小鼠和肽素(CPP)ELISA試劑盒ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法 :
1) 目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2) 以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3) 以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
小鼠和肽素(CPP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。
小鼠和肽素(CPP)ELISA試劑盒標(biāo)本的保存:
1、在5天內(nèi)測(cè)定的標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測(cè)定的需低溫凍存。
2、對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4 ℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20 ℃或 -70 ℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。
3、標(biāo)本2 -8 ℃ 可保存48小時(shí),-20 ℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。
4、部分標(biāo)本也可加入適當(dāng)防腐劑,激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
小鼠和肽素(CPP)ELISA試劑盒DD0001B DD0001B 奧普托欣(新)紙片 OXOID 50片/支
DD0002B DD0002B 桿菌肽紙片 OXOID 50片/支
DD0003B DD0003B X因子紙片 OXOID 50片/支
DD0004B DD0004B V因子紙片 OXOID 50片/支
DD0005B DD0005B X+V因子紙片 OXOID 50片/支
DD0013B DD0013B DNPG紙片 OXOID 50片/支
DD0014B DD0014B O129紙片 10ug OXOID 50片/支
DD0015B DD0015B O129紙片 150ug OXOID 50片/支
DD0016B DD0016B SPS紙片 OXOID 50片/支
ST6090 ST6090 加樣器 OXOID 6孔/個(gè)
ST8090 ST8090 加樣器 OXOID 8孔/個(gè)
DD0006A DD0006A 厭氧菌鑒定紙片 OXOID 6*50片/盒
R21121 R21121 卡他菌檢測(cè)紙片 Remel 25片/盒