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人酪氨酸羥化酶（TH）ELISA試劑盒TH試劑盒實驗過程中客戶經(jīng)常遇到的的疑問如下，下面技術(shù)部做了以下一問一答的介紹，希望可以幫助到廣大客戶：
1、我能否在實驗開始前一天收集樣品？ 
●除非試劑盒內(nèi)說明書特別說明不允許，一般都可以。
如果收集的樣品不能夠及時進(jìn)行檢測， 請保存至-20℃或者按照說明書進(jìn)行保存。應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
● -20℃是推薦的冷藏保存溫度。解凍的平衡過程可能會導(dǎo)致樣品的降解。

2、我是否必需按照試劑盒內(nèi)說明書中的方法準(zhǔn)備樣品？
●  推薦的樣品準(zhǔn)備方法是經(jīng)過實驗驗證的好的方法，所以推薦按照說明書上的方法制備樣 品。 

3、我能否不用推薦的收集方法來收集血漿？ 
●  每一次按照推薦步驟操作的測定都是經(jīng)過驗證可行的。在某些測定中有些抗凝劑是不被推薦 的。具體請參看說明書。
● 有些待檢測的分析物也存在于血小板中，因此，推薦使用低血小板血漿。正確的收集操作方 法請參看說明書。 

4、我能否使用自己的稀釋液或者緩沖液？ 
●  每個試劑盒中都含有按配方配制的與特異性樣品種屬相配套的稀釋液，以確保待檢測的樣品 被正確稀釋。具體請參看說明書。 。

6.人酪氨酸羥化酶（TH）ELISA試劑盒TH試劑盒溫度怎樣影響結(jié)果？ 
●堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶都是光敏感型酶。光密度單位或者相對光單位都會隨著溫度 的改變而變化。
● 避免在環(huán)境條件變化劇烈的地方孵育。（比如通風(fēng)口，窗口這些溫度和光照都劇烈變化的地 方） 為了保證酶結(jié)合物和底物反應(yīng)*：
●對于比色法測定： 將同體積的結(jié)合物和底物溶液充分混合（對于高靈敏度的試劑盒，在加入同體積的結(jié)合物和 底物一分鐘之后，再加入等體積的擴(kuò)增劑）。顏色若不是立即顯現(xiàn)，則檢查所加成分是否在 正確的貯藏溫度下保存，是否被污染，是否在有效期內(nèi)。 

7、我是否需要校正波長？ 
● 對于比色法測定，需要通過校正波長來減少誤差。

8、如果我沒有校正波長應(yīng)該怎么辦？ 
● 將所讀波長減去原始校正波長。這個方法可以更正光學(xué)誤差。 

9、我的酶標(biāo)儀上沒有說明上推薦的那種用來校正波長的濾光片，我可以用別的嗎？ 
● 可以。只要選擇的波長高于推薦的校正波長即可。 

10、我的酶標(biāo)儀沒有說明書上推薦的波長，我可以用別的嗎？ 
● 推薦波長由使用的底物和反應(yīng)后顏色的峰吸收度決定。說明書上一般都有相應(yīng)數(shù)據(jù)，如果沒有，則選擇zui接近的波長。不過，這種數(shù)據(jù)變化比較大。 

11、為什么我的相對光單位與說明書上的不一致？ 
●  由于工業(yè)上對于光單位的衡量沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，所以相對光單位在酶標(biāo)儀之間的變化非常 大。相對光單位的數(shù)值應(yīng)該具有可比性。 
● 使用推薦的酶標(biāo)儀設(shè)置，如果使用不同的酶標(biāo)儀則進(jìn)行相應(yīng)的等值設(shè)置。不同的設(shè)置會產(chǎn)生 不同的信號。 
●  在讀數(shù)窗口準(zhǔn)確讀數(shù)。 

12、我是按照實驗步驟進(jìn)行測定的，但是沒有任何信號，為什么？ 
●對于使用HRP底物的比色測定，終止液的加入會使底物變色。而說明書推薦的波長就是zui 適波長。 
● 通過輕拍酶標(biāo)板的邊緣充分混合孔內(nèi)試劑。加入終止液的時，顏色由藍(lán)變黃（如果是HRP 底物）。如果加終止液之前孔內(nèi)試劑沒有混合，則底物顏色變綠。 
● 可能加入試劑的順序錯誤。
● 加入底物溶液以后不要清洗酶標(biāo)板。 
● 在連續(xù)稀釋時確定已經(jīng)加入標(biāo)準(zhǔn)品。 
● 如果底物系統(tǒng)中有兩個成分，則必需混合均勻。 
● 確定酶標(biāo)儀的使用和操作正確。 
●確定試劑，標(biāo)準(zhǔn)品，樣品都正確配制并按照說明滴加無誤。 
● 對于高敏感性試劑盒，確定使用的底物和放大劑都正確稀釋。 

13、引起高背景的原因有哪些？ 
● 孵育時間和溫度的改變。 
● 不恰當(dāng)?shù)南礈臁?nbsp;
● 試劑被污染。 
● 孵育時酶標(biāo)板被污染。 
●蓋板，容器或者槍頭的重復(fù)使用

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