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豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2016-06-24 16:21:27瀏覽次數(shù):109次

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豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒標(biāo)本的處理 
可用作 ELISA 測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定,有些 則需經(jīng)預(yù)處理。 
● 血清: 
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 
● 血漿: 
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。 
●尿液、胸腹水、腦脊液: 
用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成, 應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞培養(yǎng)上清:
 檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 
●細(xì)胞: 
檢測(cè)細(xì)胞的成份時(shí),對(duì)于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10 秒后,細(xì)胞 就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉 淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進(jìn)行后續(xù)操作。 
●組織標(biāo)本: 
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑,緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

有兩種設(shè)定空白對(duì)照的方案: 
(1)將 TMB 空白顯色孔設(shè)為對(duì)照。所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去 TMB 空白顯色孔的 吸 光 值 后 , 在 坐 標(biāo) 紙 上 畫 出 曲 線 , 以 吸 光 值 作 為 縱 坐 標(biāo) , 以 濃 度 作 為 橫 坐 標(biāo) 。 
(2)將零孔設(shè)為對(duì)照。所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,得到的數(shù)據(jù)可以 直接在坐標(biāo)紙上畫出曲線。 

相關(guān)產(chǎn)品如下:Fluorescein       熒光素    1 g    現(xiàn)貨    2321-07-5    C20H12O5    332.31     490    514    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    
Fluorescein, disodium salt       熒光素二鈉鹽    100 mg    現(xiàn)貨    518-47-8    C20H10Na2O5    376.28     490    514    Water    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    橙紅色粉末,易溶于水,微溶于醇。
3-Cyano-7-hydroxycoumarin      3-氰基-7-羥基香豆素    100 mg    1~2周    19088-73-4    C10H5NO3    187.15     408    450    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    溶于DMF
7-Hydroxy-4-methylcoumarin     7-羥基-4-甲基香豆素    5 g    1~2周    90-33-5    C10H8O3    176.17     360    450    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    微黃色或黃色結(jié)晶性粉末,溶于水及氫氧化鈉
7-Hydroxy-4-methylcoumarin     7-羥基-4-甲基香豆素    100 g    1~2周    90-33-5    C10H8O3    176.17     360    450    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    微黃色或黃色結(jié)晶性粉末,溶于水及氫氧化鈉
7-Hydroxy-4-methylcoumarin     7-羥基-4-甲基香豆素    500 g    1~2周    90-33-5    C10H8O3    176.17     360    450    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    微黃色或黃色結(jié)晶性粉末,溶于水及氫氧化鈉
AMC [7-Amino-4-methylcoumarin]      7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素120    5 g    現(xiàn)貨    26093-31-2     C10H9NO2    175.18     351    430    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    用于痕量檢測(cè)酶
AMC [7-Amino-4-methylcoumarin]       7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素120    25 g    現(xiàn)貨    26093-31-2     C10H9NO2    175.18     351    430    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    用于痕量檢測(cè)酶
AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin]     7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素151    5 g    現(xiàn)貨    53518-15-3    C10H6F3NO2    229.20     380    500    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    用于標(biāo)記多肽,溶于DMSO
AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin]      7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素151    25 g    現(xiàn)貨    53518-15-3    C10H6F3NO2    229.20     380    500    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    用于標(biāo)記多肽,溶于DMSO
Nile Blue A      耐爾藍(lán)A;尼羅藍(lán)硫酸鹽;耐爾藍(lán)    25 g    現(xiàn)貨    3625-57-8    2C20H20N3O · SO4    732.85     633    672    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    綠色結(jié)晶性粉末,用于生物染色,區(qū)別脂肪酸和中性脂肪,病理組織中細(xì)菌和放線菌染色。也用于鉭的光度測(cè)定。在中和分析中用以制備混合指示劑。 
Pyronin Y      派洛寧Y     5 g    1~2周    92-32-0    C17H19ClN2O    302.80     546    549    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    
Pyronin Y      派洛寧Y     10 g    1~2周    92-32-0    C17H19ClN2O    302.80     546    549    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    
Resorufin, sodium salt       7-羥基吩惡嗪酮    5 g    現(xiàn)貨    34994-50-8    C12H6NNaO3    235.17     571    585    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    
Rhodamine 110       羅丹明110    1 g    現(xiàn)貨    13558-31-1    C20H14N2O3 · HCl    366.80     498    520    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    溶于DMSO
Rhodamine 700       羅丹明700    25 mg    1~2周                643    664    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    溶于DMSO
Rhodamine 800    羅丹明800    250 mg    1~2周    101027-54-7    C26H26ClN3O    431.96     682    698    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    溶于DMSO
Rhodamine B        羅丹明B      100 g    1~2周    81-88-9    C28H31ClN2O3    479.01     552    588    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    溶于DMSO
Rhodamine 6G        羅丹明6G      100 g    1~2周    989-38-8    C28H31N2O3Cl    479.01     530    556    DMSO    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    溶于DMSO
Sulforhodamine 101       磺基羅丹明101    500 mg    1~2周    60311-02-6    C31H30N2O7S2    606.71     586    605    Water    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    用于標(biāo)記蛋白、多肽及抗體,溶于DMF及DMSO
Sulforhodamine B         磺基羅丹明B    5 g    1~2周    3520-42-1    C27H29N2NaO7S2    580.65     556    575    Water    −20°C干燥避光保存    12個(gè)月    用于標(biāo)記蛋白、多肽及抗體,溶于DMF及DMSO

 

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