Aureobasidin A (AbA)金擔(dān)子素A（粉末）（國產(chǎn)）

產(chǎn)品標(biāo)簽

選擇性抗生素；酵母菌轉(zhuǎn)化系統(tǒng)【釀酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌轉(zhuǎn)化系統(tǒng)【構(gòu)巢曲霉、黑曲霉】；酵母單雜交/雙雜交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突變基因；

產(chǎn)品信息

【溫馨提示】：見我司整理的酵母雙雜交檢測（Yeast two-hybrid assay）產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品描述

金擔(dān)子素A（Aureobasidin A，AbA），也稱為短梗霉素A，一種來源于絲狀真菌Aureobasidium pullulans No. R106的環(huán)酯肽類抗真菌抗生素，在較低濃度（0.1-0.5μg/ml）下即可對酵母菌產(chǎn)生毒性，對該抗生素敏感的真菌包括：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、構(gòu)巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillus niger.）。金擔(dān)子素AbA通過抑制真菌生長所依賴的肌醇磷脂酰神經(jīng)酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻礙神經(jīng)酰胺到肌醇磷脂酰神經(jīng)酰胺的合成，導(dǎo)致鞘脂類物質(zhì)的合成量不足，細(xì)胞膜破裂，進(jìn)而殺死菌株。研究發(fā)現(xiàn)，來自釀酒酵母菌的AUR1和構(gòu)巢曲霉的AURA基因，兩者具有同源性，都能夠編碼IPC合成酶，對這兩種基因的點突變，也都賦予菌株對AbA產(chǎn)生很強(qiáng)的抗性，比如：突變基因AUR1-C。

酵母轉(zhuǎn)化研究中，金擔(dān)子素A（AbA）是一種非常有效的選擇性標(biāo)志，使用上基本不需優(yōu)化條件，且創(chuàng)造極低背景。AbA抗性是酵母雙雜交研究中理想的報告子，兼容于攜帶相應(yīng)抗性的酵母單雜交/雙雜交系統(tǒng)，并提供良好的篩選結(jié)果。

我司提供三種形式的金擔(dān)子素A（Aureobasidin A，AbA）：

一種是來源于進(jìn)口原料，以溶于甲醇的儲存液形式提供，濃度1mg/ml，直接用培養(yǎng)基稀釋到工作濃度即可；

一種是來源于國產(chǎn)原料，以溶于甲醇的儲存液形式提供，濃度1mg/ml，直接用培養(yǎng)基稀釋到工作濃度即可；一種是來源于國產(chǎn)原料，以粉末形式提供，用戶根據(jù)自身需求用甲醇或乙醇配制成1mg/ml的儲存液，之后用培養(yǎng)基稀釋到工作濃度即可；

AbA常用篩選濃度為100-200ng/ml，具體的篩選濃度取決于宿主細(xì)胞的敏感度【見附表1】。

產(chǎn)品特性

1） CAS NO.：127785-64-2

2） 化學(xué)名：cyclo[L-alloisoleucyl-N-methyl-L-valyl-L-leucyl-N,3-dimethyl-L-threonyl-(2R,3R)-2-hydroxy-3- methylpentanoyl-N-methyl-L-valyl-L-phenylalanyl-N-methyl-L-phenylalanyl-L

3） 同義名：Basifungin;Antibiotic R 106I;短梗霉素A

4） 分子式：C60H92N8O11

5） 分子量：1100 Da

6） 純度：≥95%

7） 熔點：155-157℃

8） 溶解性：粉末不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）

9） 化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

保存與運輸方法

保存：液體（1mg/ml）置于2-8℃密封保存，6個月有效。粉末短期置于2-8℃密封干燥保存，長期置于-20℃密封干燥保存，2年有效。

運輸：冰袋運輸。

使用方法

1） 對于金擔(dān)子素A（1 mg/ml）儲存液（貨號：MS0002-1ML，MS0002-5ML）：直接用酵母培養(yǎng)基稀釋到所需的篩選濃度，常用的篩選濃度為100-200ng/ml，具體的篩選濃度受宿主細(xì)胞的敏感度影響。

2） 對于金擔(dān)子素A粉末（貨號：MS0002-10MG）：用無水乙醇或甲醇將粉末會從分溶解配制成0.5-5mg/ml儲存液，2-8℃保存。實驗前，用酵母培養(yǎng)基稀釋到所需篩選濃度即可。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

應(yīng)用示例（來自文獻(xiàn)資源）

A.酵母單雜系統(tǒng)Y1Hgold：

文獻(xiàn)①:The screening and functional study of proteins binding with the BmNPV polyhedrin promoter. PMID: 22559085

用量：用來抑制Y1HGold (p53-AbAi)酵母菌株基礎(chǔ)表達(dá)的AbA最di濃度為200ng/ml；用來抑制Y1HGold (p3rep-AbAi)和Y1HGold (p3mut-AbAi])酵母菌株基礎(chǔ)表達(dá)的AbA最di濃度為300ng/ml。

文獻(xiàn)②: BjMYB1, a transcription factor implicated in plant defence through activating BjCHI1 chitinase expression by binding to a W-box-like element. PMID: 27353280

用量：為了開展Y1H篩選，用來抑制Y1Hgold [pBait-AbAi]和Y1Hgold [pBait-m-AbAi]酵母菌生長的AbA最di抑制濃度在SD/?Ura/+AbA培養(yǎng)基上首先確認(rèn)后為550ng/ml。

文獻(xiàn)③：Two Types of Etiological Mutation in the Limb-Specific Enhancer of Shh. PMID: 28710291

用量：第一次篩選，cDNA和線性pGADT7載體共轉(zhuǎn)化進(jìn)入Y1HGold [Hx-pAbAi]，轉(zhuǎn)化子涂布在含200ng/ml AbA的SD-Leu培養(yǎng)基。

B.酵母雙雜系統(tǒng)Y2Hgold：

文獻(xiàn)①:PbTTG1 forms a ribonucleoprotein complex with polypyrimidine tract-binding protein PbPTB3 to facilitate the long-distance trafficking of PbWoxT1 mRNA. PMID: 30824022

用量：簡言之，轉(zhuǎn)化進(jìn)pGBKT7-PbPTB3的Y2HGold用作誘餌來篩選含pGADT7載體的Y187（含cDNA文庫）轉(zhuǎn)化子。兩者在30℃接合24h，在含X-α-Gal和300ng/ml AbA的DDO (SD/-Leu/-Trp)培養(yǎng)基篩選3-5天。

附表1金擔(dān)子素（Aureobasidin, AbA）對不同酵母菌的最di抑菌濃度

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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