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上海懋康生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海懋康生物科技有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>熒光探針與細(xì)胞染色>> MX4502Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

參   考   價: 238

訂  貨  量: ≥1  件

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號MX4502

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2024-12-31 14:20:29瀏覽次數(shù):1319次

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分類 其他 級別 其他
Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純:是一種常用的紫外光激發(fā)和比率測定型Ca2+熒光探針。一旦與Ca2+結(jié)合后,F(xiàn)ura-2的Z大激發(fā)波長發(fā)生藍色遷移,由原來的363nm(Ca2+-free)遷移到335nm(Ca2+-saturated),而Z大發(fā)射波長基本未變化,保持在510nm左右。

Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純

(zui經(jīng)典的紫外激發(fā)比率型鈣離子探針)

 

【務(wù)必注意】:初次使用離子探針的用戶,強烈建議配合:Pluronic F-127, Cell Culture Tested 細(xì)胞培養(yǎng)級(MS4301-1G)一起使用,以提高探針的水溶性和胞內(nèi)加載性。 



產(chǎn)品重要特征一覽(懋康說說)

① zui經(jīng)典且高親和的鈣離子熒光探針

② 紫外雙激發(fā)比率型熒光探針(見附錄圖譜)

③C AS NO.: 108964-32-5

④ 純度:≥95%(超級純)

⑤ 供貨形式:50μg單只固體包裝,zui大程度保證產(chǎn)品運輸和保存的穩(wěn)定性。



搜索關(guān)鍵詞

Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純Fura-2, Acetoxymethyl Ester; 紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針;比率測定型 ratiometric fluorescent dye);Fluo-3Indo-1, AM;CAS NO108964-32-5;

 

產(chǎn)品信息:現(xiàn)貨供應(yīng),高純品質(zhì)。

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純

MX4502-50UG

50μg

238

Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純

MX4502-250UG

5×50μg

828

Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針,超級純

MX4502-1MG

1mg

1758

【溫馨提示】:見我司整理的鈣離子熒光探針產(chǎn)品專題。

 

基本介紹:

Fura-2是一種常用的紫外光激發(fā)和比率測定Ca2+熒光探針。一旦與Ca2+結(jié)合后,Fura-2的最大激發(fā)波長發(fā)生藍色遷移,由原來的363nmCa2+-free)遷移到335nmCa2+-saturated),而最大發(fā)射波長基本未變化,保持在510nm左右。通常情況,分別用最大激發(fā)波長340nm380nm來激發(fā)Fura-2,且用340/380nm激發(fā)下的熒光比值來檢測細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度。使用比值檢測,可消除不同細(xì)胞樣品間熒光探針裝載效率的差異,探針的滲漏,細(xì)胞厚度差異等因素導(dǎo)致的檢測誤差。Fura-21985年合成以來,廣泛用于各種細(xì)胞系統(tǒng)和生化用途,特別是數(shù)字顯微成像。單波長檢測,Fura-2Ca2+結(jié)合后,推薦用最大激發(fā)和發(fā)射波長分別為340nm510nm;雙波長檢測,則推薦用最大激發(fā)和發(fā)射波長分別為340nm380nm;
Fura-2, AMFura-2的一種乙酰甲酯衍生物,具有細(xì)胞膜滲透性,只需簡單培養(yǎng),即可輕易進入細(xì)胞。一旦進入細(xì)胞內(nèi),即被其內(nèi)酯酶剪切生成不具膜滲透性的Fura-2,從而滯留在胞內(nèi)以發(fā)揮相應(yīng)生理功能。本品以凍干粉的形式提供,使用時只需經(jīng)無水DMSO充分溶解,配置成1~5mM的儲存液,并稀釋到合適的工作濃度即可。進行細(xì)胞內(nèi)Ca2+檢測,Fura-2, AM的常用濃度為0.5~5μM

產(chǎn)品特性

CAS NO108964-32-5

 Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

同義名:Fura-2, Acetoxymethyl Ester;

分子式:C44H47N3O24

分子量:1001.86

純度:≥95% (HPLC)

外觀:黃色粉末

最大激發(fā)/發(fā)射波長:363/512 nmCa2+-free335/505 nmCa2+-saturated

溶解性:溶于DMSO1~5mM


Fura-2, AM激發(fā)光譜圖

Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

DescriptionFluorescence excitation spectra of fura-2 (MX4502) in solutions containing 0–39.8 µM free Ca2+.

保存與運輸方法

保存:-20℃干燥避光保存,有效期至少1年。 

運輸:冰袋運輸。

注意事項

1) 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

2) 乙酰氧基甲基酯(AM)易吸潮,冰箱取出后請在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑微量,開封前請將其短暫離心,以保證粉末落入管底。

3) Fura-2, AM4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可在20-25℃溫育片刻至全部融解后使用。

4) Fura-2, AM第一次使用,建議儲存液現(xiàn)配現(xiàn)用,分裝成單次用量,嚴(yán)格做到≤-20℃密封干燥凍存,以防止受潮。為了保證良好的實驗效果,盡量在短時間內(nèi)使用。

5) Fura-2, AM具有相對較強的抗光淬滅能力,細(xì)胞孵育后1h內(nèi)觀察,都不會因熒光泄露和光漂白作用導(dǎo)致測定結(jié)果發(fā)生明顯變化。

6) Fura-2不適合用激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測,因很難用它們完成激發(fā)光譜的快速轉(zhuǎn)換。

7) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

A, 試劑準(zhǔn)備

1) 配制Pluronic F-127母液 稱取100mg Pluronic F-127粉末(貨號:MS4301-100MG)中加入500μl DMSO,配制成20%(w/v) DMSO母液。溶解過程需要在40-50加熱20-30min。溶液室溫保存,不用冷藏。如有結(jié)晶析出,可以重新加熱后溶解,不影響使用。

2) HHBS Buffer (1X Hank’s Balanced Salt Solution with 20mM HEPES buffer, pH 7.3) 或者其他生理緩沖液

B,操作步驟

1) 用無水DMSO溶解Fura-2, AM配制成1-5mM的儲存液,或?qū)⒁雅浜玫?/span>Fura-2, AM儲存液取出于室溫回溫。(如:若配制成4mM的母液,需向50µg Fura-2, AM中加入12.5µl 無水DMSO)。準(zhǔn)備Fura-2, AM工作液之前,有時需要往Fura-2, AM儲存液中加入適量的20% Pluronic F-127溶液,以增強AM探針的水溶性。

:Fura-2, AM染色工作液制備前,添加等體積20% Pluronic F-127溶液到Fura-2, AM+DMSO儲存液,從而使Pluronic F-127的最終工作濃度約為0.02%。

:Pluronic F-127可以防止AM探針在溶液中聚合并促使探針更好進入細(xì)胞。但Pluronic F-127可降低AM探針的穩(wěn)定性,因此只建議在配制工作液時加入,不建議加入儲存液長期保存。

2) HHBS或其他生理緩沖液將 Fura-2, AM+DMSO儲存液稀釋到0.1-5µM的工作液。

:Fura-2, AM應(yīng)用在大部分細(xì)胞的推薦加載濃度為4-5µM,具體的使用濃度需根據(jù)實驗要求進行優(yōu)化。為了避免過度加載造成細(xì)胞毒性,建議在取得有效結(jié)果的基礎(chǔ)上盡量使用zui低探針濃度。

】:Fura-2, AM工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免反復(fù)凍存。

3) 【可選如果細(xì)胞內(nèi)含有機陰離子轉(zhuǎn)運體,丙huang舒(Probenecid,1-2.5mM)或磺吡酮(Sulfinpyrazone, 0.1-0.25mM可能需要加入細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi),以降低去酯化探針的泄露水平。

丙huang舒磺吡酮儲存液相當(dāng)偏堿,因此加入培養(yǎng)基后需要重新調(diào)整pH。

4) 準(zhǔn)備好的Fura-2, AM染色工作液加入細(xì)胞,加入量以覆蓋細(xì)胞為準(zhǔn)。37℃孵育20-60min

:若使用含血清的培養(yǎng)基,血清內(nèi)酯酶會降解AM,從而降低Fura-2, AM加載效果。而含酚紅培養(yǎng)基會使本底值略偏高,建議加入染色工作液前,對細(xì)胞清洗2~3次。

】:關(guān)于孵育的時間,如果shou次做實驗不能確定,建議先孵育30min,看熒光效果;如果細(xì)胞死亡較多,適當(dāng)縮短時間;如果熒光強度太弱,適當(dāng)延長時間。

:降低探針加載溫度可能會降低探針的區(qū)室化現(xiàn)象。

5) 吸掉染色工作液,并用HHBS或其他生理緩沖液(如有必要,使用含轉(zhuǎn)運體抑制劑如2.5mM丙磺酸的緩沖液)清洗細(xì)胞1~2次,以去除殘留探針。

6) 37℃再孵育30min以保證細(xì)胞內(nèi)AM的完quan去酯化。

7) 用熒光顯微鏡、熒光分光光度計或其他熒光檢測設(shè)備,根據(jù)實驗要求選擇合適的波長進行檢測。


 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】


上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


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