AGL1 Chemically Competent Cell 農(nóng)桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品標(biāo)簽：

AGL1菌株；農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞；Rifampicin（Rif） li福平；Kanamycin（kan）卡那mei素； EHA105；LBA4404；GV3101；EHA101；植物轉(zhuǎn)基因研究；

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產(chǎn)品描述：

AGL1菌株的染色體背景為C58，RecA，核基因含li福平抗性基因rif和羧芐青mei素抗性基因carb，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型Ti質(zhì)粒pTiBo542DT-DNA，此質(zhì)粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，pTiBo542DT-DNA質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能雖被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移）。AGL1菌株適用于擬南芥、水稻、楊樹等植物的轉(zhuǎn)基因操作。

我司提供的AGL1化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，基因型C58 RecA (rif^R/carb^R) Ti pTiBo542DT-DNA Succinamopine，經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>10⁴ cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組分：

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法【詳見懋康內(nèi)容】

相關(guān)產(chǎn)品（常用的根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞）：

基本概念：

1】感受態(tài)細(xì)胞（competent cell）：受體細(xì)胞經(jīng)過一些特殊方法的處理后，細(xì)胞膜的通透性發(fā)生暫時性的改變，從而允許外源DNA分子進(jìn)入。

2】轉(zhuǎn)化（transformation）：將外源DNA引入受體細(xì)胞并使其獲得新的遺傳性狀的一種手段，是微生物遺傳、分子遺傳和基因工程等研究領(lǐng)域的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)。

3】目前常用的轉(zhuǎn)化方法有電轉(zhuǎn)化和化學(xué)轉(zhuǎn)化法，前者需要專門的電轉(zhuǎn)化儀，但轉(zhuǎn)化效率高，特別適合大片段質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化；后者不需要額外的設(shè)備，成本較低，非難轉(zhuǎn)化的質(zhì)?；?qū)D(zhuǎn)化效率要求不高的情況都適合此方法。

電轉(zhuǎn)化： 使用電轉(zhuǎn)化需給細(xì)胞強(qiáng)加一電流。這一電流能夠在細(xì)胞膜產(chǎn)生瞬間的“小孔"，迫使帶負(fù)電荷的DNA通過一種電泳樣的效應(yīng)進(jìn)入細(xì)胞。電轉(zhuǎn)一般在0℃進(jìn)行以zui小化對細(xì)胞的熱損傷。

化學(xué)轉(zhuǎn)化：使用化學(xué)轉(zhuǎn)化將細(xì)胞重懸在CaCl₂低滲溶液（0℃）。在此情況下，Ca²⁺使得細(xì)胞膜產(chǎn)生小孔，促使DNA結(jié)合到細(xì)胞膜上并封閉掉DNA自身的負(fù)電荷。這使得DNA更容易穿透疏水性細(xì)胞膜。然后在給細(xì)胞加一個短時的42℃熱激處理，產(chǎn)生一熱流促使細(xì)胞吸收DNA復(fù)合物。

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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