F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學感受態(tài)細胞

產品標簽：

F-DH5a；F-*0；DH10B；JM109；EPI400；羧芐；卡那霉素；鏈霉素；

產品訂購：

【好消息】：見我司的感受態(tài)細胞*活動。買感受態(tài)細胞得京東卡，發(fā)表使用評論，贏紅包，雙重驚喜，行動起來啦。

產品組分：

菌株描述

DH5a菌株基因型：F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA

產品描述

本品是大腸桿菌DH5a菌株經特殊工藝制作所得的快速轉化感受態(tài)細胞，無需42℃熱激，37℃孵育步驟，只需冰浴，10min內能完成轉化、涂板步驟。經pUC19質粒檢測轉化效率可達1~5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個月轉化效率不發(fā)生改變。

注意事項

5）   產品包裝內含質粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供對照實驗用。

6）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在無菌條件的標準下進行】

一、  快速轉化操作（10min）

1.1    提前15min將用到的篩選培養(yǎng)平板拿到37℃預熱。

1.2    取F-DH5a感受態(tài)細胞從-80℃取出，迅速插入冰中，5min后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物），并用手彈打管底輕輕混勻，冰中靜置5min。

1.3    用移液槍將感受態(tài)細胞-DNA混合物轉移到37℃預熱的LB篩選培養(yǎng)平板上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，表面無水漬。

1.4    將平板倒置于37℃過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選，至少培養(yǎng)15h。

【注意】：F-DH5a感受態(tài)細胞涂含氨芐或羧芐篩選培養(yǎng)平板時效率搞，若涂卡那霉素或其他抗生素平板，轉化效率會下降（由于沒有孵育步驟，卡那霉素等對菌體毒性較大）。若要提高卡那霉素或其他抗性質粒的轉化效率，按照快速熱激轉化操作。

二、  快速熱激轉化操作（25min，能提高轉化效率）

【注意】：當質粒＞7kb，通過以下熱激轉化操作：取F-DH5a感受態(tài)細胞從-80℃取出，迅速插入冰中，5min后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物），并用手管底輕輕混勻，冰中靜置20min。

42℃水浴熱激45s，迅速放回冰上并靜置2min。加入700μl 無菌的LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃ 搖床，200 rpm振蕩培養(yǎng)30min。之后涂板。

相關產品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質產品。

F-DH5a化學感受態(tài)細胞

F-DH5a化學感受態(tài)細胞