Ar A4 Chemically Competent Cell 農(nóng)桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品標(biāo)簽：

Ar A4；Ar Qual；MSU440；K599；Agrobacterium rhizogenes發(fā)根農(nóng)桿菌；pCAMBIA2301；Streptomycin 鏈霉素；Rifampicin利福平；

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【好消息】：見(jiàn)我司懋康生物整理的根癌（發(fā)根）農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞技術(shù)專(zhuān)題。

產(chǎn)品組分：

產(chǎn)品描述

發(fā)根農(nóng)桿菌（Agrobacterium rhizogenes）是根瘤菌科農(nóng)桿屬的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌，能夠侵染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。起關(guān)鍵作用的是其攜帶的Ri質(zhì)粒，含有負(fù)責(zé)發(fā)根自主性生長(zhǎng)和冠癭堿合成的基因。結(jié)構(gòu)上與Ti質(zhì)粒類(lèi)似，主要有致毒區(qū)（Vir），T-DNA區(qū)以及冠癭堿合成功能區(qū)等。 

根據(jù)合成冠癭堿的不同，Ri質(zhì)粒分為4種類(lèi)型：1）甘露堿型；2）黃瓜堿型；3）農(nóng)桿堿型；4）米奇矛型。

發(fā)根農(nóng)桿菌菌株Ar A4含天然農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒，具有廣泛的宿主范圍（玉米，煙草，胡蘿卜、甘草等），同時(shí)具有卡那霉素抗性。 

我司（懋康生物）提供的Ar A4化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，基因型為Agrobacterium rhizogenes (kanR) Ar A4 Ri (agropine type)，經(jīng)pK7WGF2質(zhì)粒（壯觀霉素抗性）檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。

注意事項(xiàng)

7）   Ar A4具有卡那霉素抗性，不可用于具卡那霉素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。

8）   為了保證號(hào)的轉(zhuǎn)化效率，發(fā)根農(nóng)桿菌的培養(yǎng)務(wù)必使用TY培養(yǎng)基（配方見(jiàn)附表1）。

9）   為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受態(tài)細(xì)胞于室溫或手心片刻待其部分融化，達(dá)到冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰浴中使其*融化。

2)        往100μl感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入0.01~1μg質(zhì)粒DNA（轉(zhuǎn)化效率較高，*次使用前號(hào)做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量），用手快速、劇烈撥管底混勻或用槍吹吸混勻，依次放于冰中間靜置5min，液氮5min，37℃水浴5min，冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室溫，加入700μl無(wú)抗生素的TY液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2h。

4)        6,000rpm離心1min，吸掉600ul上清，之后用槍輕輕吹打重懸菌體。之后加到含相應(yīng)抗生素的TY平板上，用無(wú)菌玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開(kāi)。室溫正置10 min，待液體被吸收后，倒置平板，28℃培養(yǎng)2-3天。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠(chéng)為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

Ar A4化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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