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上海懋康生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海懋康生物科技有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>熒光探針與細(xì)胞染色>> MF4001螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè) 探針與染色

螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè) 探針與染色

參   考   價(jià): 716

訂  貨  量: ≥1  盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)MF4001

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2024-03-14 13:06:21瀏覽次數(shù):1260次

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螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè) 探針與染色 螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)普遍用作一種報(bào)告基因來研究基因調(diào)控和功能,以及用于藥物篩選。由于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織缺乏任何內(nèi)源性的熒光素酶活性和生物發(fā)光的天然屬性,螢火蟲熒光素酶是一種非常靈敏的遺傳報(bào)告子。

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品標(biāo)簽

Firefly Luciferase 螢火蟲熒光素酶Photinus pyralis;報(bào)告基因檢測(cè);D-luciferin sodium D-熒光su鈉鹽;ATP生物發(fā)光檢測(cè);CAS:61970-00-1;

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

MF4001-100T

100T

716

MF4001-1000T

1000T

3966

產(chǎn)品描述

螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)普遍用作一種報(bào)告基因來研究基因調(diào)控和功能,以及用于藥物篩選。由于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織缺乏任何內(nèi)源性的熒光素酶活性和生物發(fā)光的天然屬性,螢火蟲熒光素酶是一種非常靈敏的遺傳報(bào)告子。螢火蟲螢光素酶是一種分子量~61kD的蛋白,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以催化螢光素(Luciferin)氧化成氧化熒光素(Oxyluciferin),在此氧化過程中釋放出生物螢光(Bioluminescence)。這一熒光可通過化學(xué)發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。

本螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit),正是利用螢光素為底物來檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)螢火蟲螢光素酶活性的試劑盒,操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏且呈良好的線性關(guān)系。

產(chǎn)品組分

組分編號(hào)

組分名稱

產(chǎn)品貨號(hào)(規(guī)格)

MF4001-100T

MF4001-1000T

MF4001-A

Cell Culture Lysis Buffer細(xì)胞裂解液

60ml

10×60ml

MF4001-B

Luciferase Assay Reagent螢火蟲熒光素酶檢測(cè)試劑

10ml

10×10ml

保存與運(yùn)輸方法

保存:細(xì)胞裂解液置于4℃保存三個(gè)月有效,-20℃保存一年有效;螢火蟲熒光素酶檢測(cè)試劑置于-20℃六個(gè)月有效,-80℃避光保存一年有效;

運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

  • 為了保證螢火蟲熒光素酶檢測(cè)試劑的穩(wěn)定性,建議初次使用進(jìn)行適當(dāng)分裝,避光凍存,盡量降低反復(fù)凍融次數(shù)。內(nèi)部測(cè)試顯示反復(fù)凍融三次對(duì)測(cè)定結(jié)果無明顯影響。

  • 由于溫度對(duì)酶活性有影響,測(cè)定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測(cè)定。

  • 為取得加測(cè)定結(jié)果,用單管的化學(xué)發(fā)光儀測(cè)定時(shí),樣品和試劑混合后到測(cè)定前的時(shí)間需盡量控制在相同時(shí)間,比如30s內(nèi);使用具化學(xué)發(fā)光測(cè)定功能的多功能熒光酶標(biāo)儀時(shí),hao xian把樣品全部加好,然后統(tǒng)一加入螢火蟲熒光素酶檢測(cè)試劑。

  • 樣品和試劑混合后,必須等待1~2s,再進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定時(shí)間通常為10s,根據(jù)情況可適當(dāng)延長或縮短,但同一批樣品宜使用相同的測(cè)定時(shí)間。

  • 為避免由于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞效率差異引起的誤差,可同時(shí)轉(zhuǎn)入海腎熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,用我司的雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):MF4010-100T)進(jìn)行檢測(cè)。

  • 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 細(xì)胞裂解

1.1 將含轉(zhuǎn)染有報(bào)告基因質(zhì)粒的細(xì)胞內(nèi)的培養(yǎng)基去除,對(duì)于貼壁細(xì)胞直接加PBS輕輕洗滌,對(duì)于懸浮細(xì)胞,低速離心收集細(xì)胞后用PBS輕輕洗滌。

1.2 將細(xì)胞裂解液充分混勻后,按下表用量來加入適量細(xì)胞裂解液,之后將培養(yǎng)板放在微型振蕩器上室溫震蕩15min,以充分裂解細(xì)胞。

培養(yǎng)皿類型

96孔板

48孔板

24孔板

12孔板

6孔板

細(xì)胞裂解液(μl/孔)

100

150

200

300

500

注①】:如果熒光素酶的表達(dá)水平比較低,可嘗試使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可減少到100μl?!咀?/span>】:細(xì)胞裂解后可立即測(cè)定熒光素酶活,也可置于-70℃凍存,避免反復(fù)凍融,待以后再測(cè)定。凍存樣品需充分融解,達(dá)到室溫后再進(jìn)行酶活測(cè)定。

1.3 將充分裂解后的產(chǎn)物于10,000~15,000rpm室溫離心3~5min,取上清用于測(cè)定。


二、 熒光素酶檢測(cè)

2.1 融解螢光素酶檢測(cè)試劑,并達(dá)到室溫。

2.2 按儀器說明書開啟化學(xué)發(fā)光儀或具有檢測(cè)化學(xué)發(fā)光功能的多功能酶標(biāo)儀,設(shè)定參數(shù),測(cè)定間隔設(shè)為2s,測(cè)定時(shí)間設(shè)為10s。

2.3 將細(xì)胞裂解產(chǎn)物按照20~100μl的體積加入測(cè)量管中(如果裂解產(chǎn)物足夠,請(qǐng)加入100μl;如果裂解產(chǎn)物不足可以適當(dāng)減少用量,但同批裂解產(chǎn)物的使用量宜保持*)。

2.4 加入100μl螢光素酶檢測(cè)試劑,用槍打勻或用其它適當(dāng)方式混勻后測(cè)定RLU(Relative light unit)。以細(xì)胞裂解液為空白對(duì)照。

相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

MF4001-100T

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)

100T

MF4006-100T

Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit 海腎螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)

100T

MF4010-100T

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

100T

MX4602-100MG

D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光su鈉鹽

100mg

MX4603-100MG

D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽

100mg

MX4606-500UG

Coelenterazine Native 天然腔腸素

500μg

MX4608-500UG

Coelenterazine h 腔腸素h

500μg



— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】



上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)  探針與染色

螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)  探針與染色


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