Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

一氧化氮檢測試劑盒（顯色法）

產(chǎn)品標簽

Nitric Oxide (NO) 一氧化氮；NO含量檢測；分光光度計檢測；Griess reagent；Carboxy-PTIO 一氧化氮清除劑；DAF-FM DA；

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

一氧化氮（Nitric Oxide, NO）是一種活性基，在許多關鍵生理功能中發(fā)揮重要作用。一氧化氮，一氧化氮合酶（NOS）催化jing氨suan的氧化產(chǎn)物，參與宿主防御和發(fā)育、調節(jié)蛋白活化、以及與功能生物分子之間的直接共價相互作用。一氧化氮生成后迅速代謝生成亞硝酸鹽（Nitrite）和硝酸鹽（Nitrate），兩種首要的、穩(wěn)定的和非揮發(fā)性的裂解產(chǎn)物，通過對這兩種產(chǎn)物的測定能間接反映樣本內的一氧化氮水平。

本一氧化氮檢測試劑盒（Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit）利用經(jīng)典的Griess reagent，對亞硝酸鹽進行定量測定。本試劑盒以亞硝suan鈉為標準品，通過優(yōu)化的檢測體系，檢測下限達1μM，且在1~100μM范圍內具有好的的線性關系。本試劑盒不僅能檢測細胞、組織或培養(yǎng)液中的一氧化氮含量，還能檢測血清、血漿或尿液中的一氧化氮含量。

產(chǎn)品組成

保存與運輸方法

保存：2-8℃避光保存，至少4個月穩(wěn)定。

運輸：冰袋運輸。

保存與運輸方法

保存：-20℃干燥保存，至少1年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

• 本試劑盒內的組分若保存不當發(fā)生顏色變化或沉淀，說明溶液已經(jīng)失效，請勿再用。

• 當檢測細胞或組織一氧化氮含量，不建議使用RIPA裂解液，因其可能在后續(xù)實驗中產(chǎn)生沉淀，影響測試。建議使用免疫印跡及免疫沉淀用裂解液（不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑）（貨號：MP1508-100ML）。

• 本試劑盒僅測定的是亞硝酸鹽含量，不能檢測硝酸鹽，反映的并非總一氧化氮含量，只能在很大程度上反映一氧化氮的相對量，適合不需要精確定量的實驗。若需要測定總一氧化氮含量，請選擇總一氧化氮檢測試劑盒（顯色法）（貨號：MX4732-50T），此試劑盒利用硝酸鹽還原酶將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，然后利用Griess reagent測定亞硝酸鹽，進而反映總一氧化氮水平。

• 本試劑盒對人體有害，請注意適當防護，避免直接接觸人體或吸入體內。

• 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

操作步驟

【注意】本試劑盒可用于培養(yǎng)液中的一氧化氮測定，培養(yǎng)液內的酚紅和10%血清對測定無明顯干擾。

【注意】本試劑盒可用于血清中的一氧化氮測定。當只需粗略計算，可直接用水稀釋標準品，從而計算出血樣中一氧化氮含量。當需精確計算，如果待測的正常血清是常見血清，能從文獻查閱到一氧化氮濃度，那么用此已經(jīng)一氧化氮濃度的正常血清稀釋標準品，這樣能得到比較精確的一氧化氮濃度?；蚴褂靡阎獫舛鹊娜嘶蚱渌麆游镅鍋硐♂寴藴势芬部蛇_到目的?；騾⒖嘉墨I進行血清中一氧化氮濃度的測定。

【注意】樣品中存在的一些內在成分可能會干擾測定，導致OD值和靈敏度降低。干擾程度依次順序：尿液>血清>血漿>培養(yǎng)基。

• 需要設備

96孔酶標儀或可見光分光光度計，加波長540nm，或在520~560nm下測定，靈敏度可能會降低。

• 準備步驟

2.1 實驗前將試劑從冰箱取出回溫至室溫。

2.2 標準品準備：每次測量均新做標準曲線，用待測樣品所用溶液來稀釋標準品，使得濃度在1~100μM內。

比如：當樣品為細胞培養(yǎng)液上清，細胞培養(yǎng)液為DMEM+10% FBS，則用DMEM+10% FBS稀釋標準品。標準品的濃度通?？扇?，1，2，5，10，20，40，60，80，100μM。

2.3 樣品準備：a）當樣品為培養(yǎng)液上清，可直接取樣。如果存在沉淀物，則需離心后取上清；b）當樣品為組織或細胞，可快速凍融裂解，然后離心沉淀取上清，體積不足50μl，可用雙蒸水、超純水或0.9% NaCl稀釋（相應的標準品也需用雙蒸水、超純水或0.9% NaCl稀釋）。細胞或組織也可用免疫印跡及免疫沉淀用裂解液（不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑）來裂解，同樣的，標準品需用裂解液稀釋。

三、測定步驟

3.1 取50μl標準品或樣品，加入96孔板內，做好標記；

3.2 每孔加入提前回至室溫的50μl Griess reagent I；

3.3 每孔加入提前回至室溫的50μl Griess reagent II；

3.4 室溫避光孵育5min；

3.5 在540nm（或520~560nm）測定吸光度。需在30min內測完，以防褪色降低靈敏度。

3.6 以標準品濃度為橫坐標，吸光度OD值為縱坐標繪制標準曲線，獲得橫縱坐標之間的函數(shù)關系式。之后將樣品OD值代入公式來計算一氧化氮濃度。

相關產(chǎn)品

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質產(chǎn)品。

一氧化氮檢測試劑盒（顯色法）細胞染色

一氧化氮檢測試劑盒（顯色法）細胞染色