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BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi Gateway™ 載體試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)Invitrogen

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更新時(shí)間:2023-05-12 10:51:13瀏覽次數(shù):85次

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產(chǎn)品簡介

BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi Gateway™ 載體試劑盒

詳細(xì)介紹

在 BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi 表達(dá)系統(tǒng)中提供的 pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 表達(dá)載體可用于從慢病毒載體中高效引入和體內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)短發(fā)夾 RNA (shRNA)。一種新型克隆方法使 ~50-bp DNA 寡核苷酸緊接著 U6 pol III 啟動(dòng)子進(jìn)入 BLOCK-iT™ U6 入門載體。寡核苷酸設(shè)計(jì)用于表達(dá)可形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)的 RNA,該結(jié)構(gòu)包含目的靶基因的正義區(qū)和反義區(qū)。然后將該 shRNA 重組到 pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 載體中。病毒產(chǎn)生和轉(zhuǎn)導(dǎo)后,U6 啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的 shRNA 作為 RNAi 盒穩(wěn)定整合。產(chǎn)生的 shRNA 避免了宿主防御機(jī)制,并將有效地產(chǎn)生 RNAi 基因敲低反應(yīng)(圖 1)。

pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 載體(圖 2)可提供:

?與包含 RNAi 盒的 attL-flanked U6 Gateway™ 入門載體進(jìn)行有效重組的 attR 位點(diǎn)
?高效慢病毒包裝和目標(biāo) shRNA 遞送所需的所有組分
?用于快速、有效篩選表達(dá) shRNA 的穩(wěn)定細(xì)胞系的殺稻瘟菌素選擇標(biāo)記 利用 BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi 表達(dá)系統(tǒng),可實(shí)現(xiàn)分裂和非分裂哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型和動(dòng)物模型中基因阻斷的長期分析。

BLOCK-iT™ RNAi U6 入門載體試劑盒允許進(jìn)行 shRNA 靶序列的簡化克隆以在瞬時(shí)實(shí)驗(yàn)中驗(yàn)證效果。通過標(biāo)準(zhǔn) Gateway™ LR 重組反應(yīng),將選定的 RNAi 表達(dá)盒從 BLOCK-iT™ RNAi U6 入門載體快速有效地重組到 pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 載體中(圖 3)。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.


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