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BACE1(β-分泌酶)FRET 檢測(cè)試劑盒,紅色

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BACE1(β-分泌酶)FRET 檢測(cè)試劑盒,紅色

詳細(xì)介紹

BACE1(β-分泌酶)是一種關(guān)鍵酶,它參與了在阿爾茨海默病 (AD) 的細(xì)胞外淀粉樣蛋白斑塊中發(fā)現(xiàn)的淀粉樣蛋白 β-肽 (Abeta) 的生成。在某些情況下,早發(fā)性家族性 AD 可歸因于淀粉樣蛋白前體蛋白 (APP) 的“瑞典"突變,該突變通過(guò) BACE1 顯著增強(qiáng)該蛋白的切割。這和其他遺傳以及病理學(xué)證據(jù)形成了專注于抑制 BACE1 和其他 APP 切割酶(如 γ-分泌酶)的治療方法。BACE1 熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET) 檢測(cè)試劑盒為篩選潛在 BACE1 抑制劑提供了一種靈敏和高效的方法。該試劑盒使用純化的桿狀病毒表達(dá)的 BACE1 和基于“瑞典"突變體的新紅色 FRET 肽底物。

BACE1 FRET 檢測(cè)試劑盒具有以下特點(diǎn):

?發(fā)射紅光以減少化合物干擾
? 激發(fā)波長(zhǎng)為 545 nm,讀取發(fā)射波長(zhǎng)為 585 nm
? 在溶液中執(zhí)行的易于使用、快速、均勻的檢測(cè)
? 適用于高通量篩選的通用規(guī)格
? 結(jié)果穩(wěn)定 — 可進(jìn)行長(zhǎng)達(dá) 24 小時(shí)的測(cè)量

BACE1 FRET 檢測(cè)的原理如下:用兩種熒光基團(tuán)(一種熒光供體(羅丹明 (Rh) 衍生物)和一種專有的淬滅受體)合成肽底物。選擇這兩個(gè)基團(tuán)之間的距離,使得在光激發(fā)時(shí)供體 (D) 熒光能量由受體 (A) 通過(guò)量子力學(xué)現(xiàn)象(被稱為共振能量轉(zhuǎn)移)顯著淬滅(圖 1)。經(jīng)蛋白酶切割后,熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,可恢復(fù)供體的全熒光得率。因此,弱熒光肽底物在酶促切割時(shí)變?yōu)楦邿晒馕镔|(zhì);熒光增加與蛋白水解速率呈線性相關(guān)。

BACE1 酶的來(lái)源:
在重組桿狀病毒感染的昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)了編碼人 BACE1 的第 1-460 位氨基酸的 cDNA 序列,與胞外域相對(duì)應(yīng)。純化的 BACE1 以 proBACE1 形式存在,表觀分子量為 55 kDa,N 端序列為 TQHGIRLPLR。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.


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