質(zhì)譜法 (MS) 是鑒別蛋白磷酸化位點(diǎn)并定量測(cè)定磷酸化變化的關(guān)鍵工具。但是，由于磷酸肽的化學(xué)計(jì)量較低、親水性高、電離度差且磷酸化不完整，蛋白磷酸化的 MS 分析具有挑戰(zhàn)性。由于復(fù)合蛋白樣品中磷酸化修飾的相對(duì)豐度較低，富集對(duì)于成功的磷酸肽 MS 分析至關(guān)重要。High-Select Fe-NTA 和 TiO2 磷酸肽富集試劑盒聯(lián)合 C18、石墨離心和高 pH 反相肽分餾柱，補(bǔ)充了裂解、還原、烷基化和......

詳細(xì)介紹

? 便利—以離心柱（Fe-NTA 和 TiO₂）或磁珠 (Fe-NTA) 形式提供預(yù)配制緩沖液，易于使用，能夠?qū)Χ喾輼悠愤M(jìn)行平行處理
? 高特異性—以 > 90% 的選擇性回收磷酸肽
? 出色的回收率—與其他市售樹脂相比，能夠富集較多總磷酸肽和磷酸肽
? 高覆蓋范圍—回收具有單一和多磷酸化位點(diǎn)的肽
? 可擴(kuò)展—兼容自動(dòng)化操作，包含使用 KingFisher 磁珠純化儀

High-Select Fe-NTA 磷酸肽富集試劑盒使用離心柱中的鐵螯合樹脂從復(fù)雜樣品中富集磷酸肽。每柱可富集 0.5 至 5 mg 總蛋白酶切物的磷酸肽，作為起始樣品。配合使用預(yù)配制緩沖液，改進(jìn)和簡(jiǎn)化的程序可在不到 45 分鐘內(nèi)富集多達(dá) 150 µg 的磷酸肽，選擇性大于 90%。

High-Select TiO2 磷酸肽富集試劑盒包括 24 個(gè) (TiO2) 離心吸頭和優(yōu)化的緩沖液，可促進(jìn)富集磷酸肽的制備。每柱可富集 0.5 至 3 mg 總蛋白酶切物的磷酸肽，作為起始樣品。經(jīng)優(yōu)化的緩沖液和簡(jiǎn)化的程序消除了對(duì)洗脫緩沖液中的吡咯烷和使用石墨離心柱進(jìn)行后續(xù)清理的需求。使用該試劑盒可以富集多達(dá) 150 µg 的磷酸肽，選擇性大于 90%。TiO2 富集了一組的磷酸肽，可補(bǔ)充 High-Select Fe-NTA IMAC 磷酸肽富集試劑盒。

High-Select Fe-NTA 磁性磷酸肽富集試劑盒使用鐵螯合磁性瓊脂糖微珠，從復(fù)雜樣品中富集磷酸肽。每次反應(yīng)足以在不到 45 分鐘內(nèi)從 0.5–5 mg 總蛋白酶切物富集 250–1000 µg 磷酸肽，作為起始樣品。此外，試劑盒也可用于富集含官能團(tuán)的化學(xué)修飾肽，設(shè)計(jì)用于配合固定化金屬親和色譜樹脂一起使用。

High Select Fe-NTA 磁性瓊脂糖專門設(shè)計(jì)用于富集磷酸肽和化學(xué)修飾肽，以進(jìn)行 MS 分析。我們的非聚集性磁石 (Fe₃O₄) 是一種超順磁性微珠，具有出色的均勻性，可在手動(dòng)和自動(dòng)純化應(yīng)用中實(shí)現(xiàn)高性能純化。Fe-NTA 磁性瓊脂糖可單獨(dú)購(gòu)買，滿足實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的靈活性。

對(duì)于富集磷酸肽的高分辨率分析，推薦用于 Nanospray Flex 源的 LC 色譜柱為 Acclaim PepMap 100 C18 LC 色譜柱（貨號(hào) 164942 或 164939）。對(duì)于 EASY-Spray 離子源，推薦的 LC 色譜柱為 EASY-Spray C18 LC 色譜柱（貨號(hào) ES902 或 ES903）。獨(dú)立的 High Select Fe-NTA Magnetic Agarose 微珠可靈活設(shè)置規(guī)模和通量，可用于手動(dòng)和自動(dòng)化平臺(tái)，包含 KingFisher 96 和 KingFisher Flex 磁粒子處理器。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

關(guān)鍵詞：色譜柱

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High-Select™ 磷酸化多肽富集試劑盒和試劑

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