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NAb™ 蛋白 L 離心試劑盒，0.2 mL

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產(chǎn)品型號Thermo Scientific

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更新時間：2023-08-08 13:19:23瀏覽次數(shù)：143次

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產(chǎn)品簡介

NAb™ 蛋白 L 離心試劑盒，0.2 mL

詳細介紹

Thermo Scientific™ NAb™ 蛋白 L 離心試劑盒便于對各種樣品類型中的抗體進行快速、小規(guī)模親和純化。固定化蛋白樹脂的每個預(yù)裝微量離心柱可從 25-500µL 血清或其他樣品中快速純化 100-1000µg 的 IgG。實際純化的 IgG 數(shù)量取決于樣品類型和所使用的特定離心柱。每個試劑盒都包括足夠用于純化至少 10 份抗體樣品的收集管、緩沖液和簡化方案。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖包含已共價固定至高質(zhì)量的 6% 交聯(lián)的微珠化瓊脂糖 (CL-6B) 的重組蛋白 L。該特殊種類的樹脂可提供通用的色譜特點組合，用于獲得高得率的目標免疫球蛋白和對目標免疫球蛋白進行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖的特點：

?蛋白 L – 固定化蛋白 L 適用于選擇性純化具有 κ 輕鏈的人和小鼠抗體
? 瓊脂糖樹脂 – 支持物為 6% 交聯(lián)的微珠化瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法的樹脂
? 惰性且穩(wěn)定 – *的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 L，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標準容量 – Pierce 蛋白 L 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 L，提供5至10 mg 人 IgG/mL 樹脂的結(jié)合容量

應(yīng)用：
? 純化與蛋白 A 或蛋白 G 瓊脂糖結(jié)合能力較差的單克隆和多克隆抗體
? 從添加牛血清的培養(yǎng)物上清液中純化單克隆抗體
? 蛋白 L 免疫沉淀和免疫共沉淀試驗
? 純化 ScFv 和含 κ 輕鏈的 Fab 片段

蛋白 L 是一種源自大消化鏈球菌這種細菌的免疫球蛋白結(jié)合蛋白 (36kDa)，但現(xiàn)可通過重組法在大腸桿菌中生產(chǎn)。與主要通過免疫球蛋白 Fc 區(qū)（例如：重鏈）結(jié)合的蛋白 A 和蛋白 G 不同，蛋白 L 通過與輕鏈反應(yīng)來結(jié)合免疫球蛋白。由于結(jié)合反應(yīng)無需依靠重鏈的任何部分參與，因此與蛋白 A 和 G 相比，蛋白 L 能夠結(jié)合更廣泛的免疫球蛋白類型。蛋白 L 可與免疫球蛋白的所有代表類型相結(jié)合，包括 IgG、IgM、IgA、IgE 和 IgD。單鏈可變片段 (ScFv) 和 Fab 片段也可與蛋白 L 結(jié)合。

雖然蛋白 L 能夠廣泛結(jié)合多種 Ig 類型，但它并不是通用的免疫球蛋白結(jié)合蛋白。蛋白 L 僅能與含有 κ 輕鏈（即 VL 結(jié)構(gòu)域的 κ 鏈）的免疫球蛋白結(jié)合。人和小鼠的免疫球蛋白以 κ 輕鏈為主。其他免疫球蛋白則以 λ 輕鏈為主。此外，蛋白 L 僅能有效結(jié)合某些亞型的 κ 輕鏈。例如，它能夠結(jié)合人類的 VkI、VkIII 和 VkIV 亞型，但無法與 VkII 亞型結(jié)合。小鼠免疫球蛋白的結(jié)合局限于具有 VkI 輕鏈的蛋白。

鑒于這些特定的有效結(jié)合要求，固定化蛋白 L 的主要應(yīng)用是從腹水或培養(yǎng)物上清液中純化已知具有 κ 輕鏈的單克隆抗體。蛋白 L 對于純化培養(yǎng)物上清液中含有 VLk 的單克隆抗體非常有效，因為它不會結(jié)合存在于培養(yǎng)基血清補充液中的牛免疫球蛋白。此外，蛋白 L 不會干擾抗體的抗原結(jié)合位點，使其可用于免疫沉淀試驗，即使使用 IgM 也是如此。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)方法制備而成，與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多種優(yōu)勢。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團，從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合容量樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 L。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖是一種多功能親和樹脂，用于純化包含特定 κ 輕鏈的哺乳動物 IgG 同種型。蛋白 L 特別適用于分離小鼠 IgG VkI 以及人 IgG VkI、VkIII 和 VkIV 的單克隆抗體。

交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性：
?支持 pH 值穩(wěn)定性：2 至 14（短期）；3 至 13（長期）
? 平均粒徑：45 至 165 微米
? 排阻極限：10,000至4,000,000 道爾頓
?體積流速：約1 mL/分鐘（對于1 cm 直徑柱）
?線性速度：30 cm/h
? 壓力：低于 25psi (1.5 bar)；定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降（注：液相色譜裝置的指示表壓可能測量的是總系統(tǒng)壓力，而不是跨色譜柱壓降。）

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? 使用抗體結(jié)合蛋白進行抗體純化

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NAb™ 蛋白 L 離心柱，0.2 mL
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