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Pierce™ 重組蛋白 G

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產(chǎn)品型號Thermo Scientific

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更新時間:2023-11-06 15:58:14瀏覽次數(shù):105次

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產(chǎn)品簡介

Pierce™ 重組蛋白 G

詳細(xì)介紹

在免疫檢測和抗體純化方案中,純化(未結(jié)合)Thermo Scientific Pierce 重組蛋白 G 可作為制備用于檢測或純化兔和人抗體(特別是 IgG 同種型)的各種探針或親和基質(zhì)的基礎(chǔ)。

重組蛋白 G 的特點(diǎn):

?每個蛋白含有兩個 Fc 結(jié)合結(jié)構(gòu)域
? 對于小鼠(包括 IgG1)、人(包括 IgG3)以及大鼠、山羊和??贵w,優(yōu)于蛋白 A
? 對于豚鼠、豬、犬和貓,弱于蛋白 A
? 不結(jié)合人 IgM、IgD 或 IgA

蛋白 G 是一種從 G 群鏈球菌中分離得到的細(xì)菌細(xì)胞壁蛋白。天然蛋白 G 的 DNA 測序可鑒定兩個 IgG 結(jié)合結(jié)構(gòu)域以及白蛋白和細(xì)胞表面結(jié)合位點(diǎn)。白蛋白和細(xì)胞表面結(jié)合結(jié)構(gòu)域已從重組蛋白 G 中消除以減少非特異性結(jié)合,因此,可用于從粗樣品中分離 IgG。理想結(jié)合發(fā)生在 pH 5條件下,盡管在 pH 7.0 - 7.2條件下結(jié)合也有效。

重組蛋白 G 的性質(zhì):
? 來源:大腸桿菌
? 分子量:~21,600(使用 SDS-PAGE 測量的表觀 MW:32,000)
?形式:無鹽粉末
? 0.1% 溶液的 A280:1.0
? 等電點(diǎn) (pI):4.5

由于對于大多數(shù)哺乳動物 IgG,蛋白 G 比蛋白 A 具有更高親和力,它可用于純化不能與蛋白 A 很好結(jié)合哺乳動物 IgG。蛋白 G 與多個 IgG 亞型(如人 IgG3、小鼠 IgG1 和大鼠 IgG2a)結(jié)合的容量明顯高于蛋白 A。但是,蛋白 G 不與人 IgM、IgD 和 IgA 結(jié)合。蛋白 A 和蛋白 G 之間的結(jié)合特性差異可通過各個蛋白的 IgG 結(jié)合位點(diǎn)的不同成分加以解釋。這些蛋白的三級結(jié)構(gòu)非常相似,盡管它們的氨基酸成分顯著不同。

報告的 IgG 與蛋白質(zhì) G 的結(jié)合特性存在不一致。蛋白 G 的分離和生產(chǎn)方法差異可能影響 IgG 結(jié)合,部分原因是在不同來源的蛋白 G 上存在不同數(shù)量的 IgG 結(jié)合位點(diǎn)。已使用天然蛋白 G 和多種不同的重組形式進(jìn)行了結(jié)合研究。已使用幾種測定方法來確定相對親和力,包括放射標(biāo)記實(shí)驗(yàn)和 ELISA 技術(shù)。親和測定的不同或許可以解釋部分的不一致。此外,使用不同的緩沖液時,會有明顯的結(jié)合差異。與20 mM Tris 緩沖液 (pH 7.5) 相比,當(dāng)使用蛋白 G 結(jié)合緩沖液時,與蛋白 G 結(jié)合的大鼠血清 IgG 約增加 44%。

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