細(xì)胞:T84細(xì)胞
中文名稱:人結(jié)直腸癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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研究通過了檢測(cè)肝硬化后期患者肝細(xì)胞的新陳代謝發(fā)明了一種可以延長(zhǎng)那些等待肝臟移植的患者的生存時(shí)間的新療法。
全球肝病病例持續(xù)增長(zhǎng),特別是那些高脂肪飲食和肥胖問題的國家。(人H9細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人T淋巴瘤細(xì)胞)迄今為止仍不清楚肝硬化后期導(dǎo)致肝細(xì)胞停止工作的罪魁禍?zhǔn)?,而該研究通過檢測(cè)肝硬化不同階段的生化指標(biāo)解決了這一問題。
該研究使用大鼠作為模型,模擬了人類的肝臟環(huán)境,特別是病理學(xué)特性。研究人員對(duì)模型的肝細(xì)胞樣本從化學(xué)和遺傳學(xué)方面進(jìn)行了詳細(xì)的檢測(cè),特別是細(xì)胞制造的三磷酸腺苷(ATP)在不同時(shí)期的變化。
(人H292細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人肺癌細(xì)胞)
在正常肝細(xì)胞中,大多數(shù)ATP由線粒體通過一種稱為氧化磷酸化(Oxidative phosphorylation)的過程制造,而以往的研究表明,糖酵解(制造ATP的另一種形式)在患病肝細(xì)胞中非常活躍。
(人ZR-75-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞)
線粒體制造ATP比糖酵解更高效,但當(dāng)機(jī)體需要額外能量修復(fù)自身或應(yīng)對(duì)危機(jī)時(shí),兩種制造ATP的過程都會(huì)發(fā)生。同時(shí),一些癌細(xì)胞幾乎只依靠糖酵解提供的能量,因此人們自然想到糖酵解與肝病的有關(guān)。
(大鼠SHZ-88細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 大鼠乳癌細(xì)胞)
肝硬化細(xì)胞中通過線粒體制造的能量會(huì)減少,以前多認(rèn)為這是肝臟新陳代謝障礙的主要因素,而該研究發(fā)現(xiàn)線粒體通路的下調(diào)并不足以導(dǎo)致肝細(xì)胞新陳代謝障礙,糖酵解通路被上調(diào)以制造更多的能量才是原因;
(人H1299細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)
由此產(chǎn)生的代謝物使肝細(xì)胞在肝臟后期時(shí)不能維持這些糖酵解通路的產(chǎn)出,導(dǎo)致ATP的凈生產(chǎn)下降,繼而肝細(xì)胞無法使用糖酵解來維持能量生產(chǎn)。
這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)可用于指導(dǎo)醫(yī)生使用針對(duì)糖酵解通路的藥物,延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間。