細(xì)胞:Caki-1細(xì)胞
中文名稱:人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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肺癌藥物抗性的一個(gè)關(guān)鍵基因確定
大約20%對(duì)Tarceva或Iressa產(chǎn)生抗性的腫瘤患者,其抗性是由一種癌基因的遺傳活化造成,而這種基因卻不是這些藥物的通常靶標(biāo)——這一點(diǎn)在之前從來(lái)沒有被科學(xué)家注意過。
更重要的是,研究人員還確定出了對(duì)付這些抗性腫瘤的一種潛在的方法,即聯(lián)合使用能直接靶向兩種蛋白質(zhì)靶標(biāo)的藥物。
(人Kasumi-1細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人急性淋巴白血病毒細(xì)胞)
Iressa等藥物常用于治療晚期非小細(xì)胞肺癌,這些藥物通過抑制表皮生長(zhǎng)因子受體起作用。只有EGFR基因突變放大細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)因子反應(yīng)的腫瘤才對(duì)這些藥物治療起反應(yīng)。
(小鼠BV2細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞)
為了找到未知的抗性產(chǎn)生原因,研究人員在實(shí)驗(yàn)室中模擬了肺癌患者體內(nèi)發(fā)生的情況。他們利用對(duì)EGFR突變敏化的肺癌細(xì)胞系,研究了EGFR控制的細(xì)胞信號(hào)途徑。
(人ARPE-19細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)
在早期的研究中,研究人員發(fā)現(xiàn)以EGFR開頭的生長(zhǎng)信號(hào)通過一種相關(guān)蛋白起作用,這種蛋白叫做ERBB3。
這項(xiàng)新的研究則證實(shí),在一些抗性細(xì)胞中,ERBB3蛋白因一種不同的癌基因MET因擴(kuò)增而被活化——這是抑制EGFR以外的途徑。
(人UM-UC-3細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人膀胱移行細(xì)胞癌)
對(duì)患者腫瘤樣本的分析顯示,MET基因在18個(gè)抗性腫瘤患者中的4個(gè)患者樣本中被擴(kuò)增。盡管單獨(dú)用Iressa或一種MET抑制劑單獨(dú)處理細(xì)胞系是不能阻止腫瘤的生長(zhǎng)的,但是同時(shí)使用這兩種物質(zhì)則能夠誘導(dǎo)這些細(xì)胞死亡。