細(xì)胞：PIEC細(xì)胞
中文名稱：豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
胚胎干細(xì)胞的研究進(jìn)展
在體外,ES可以被無限期地培養(yǎng),并分化成多種類型的細(xì)胞,為細(xì)胞替代治療提供用之不竭的來源。由于涉及到倫理問題,目前胚胎干細(xì)胞的研究還限于動(dòng)物試驗(yàn)。
有學(xué)者已成功建立小鼠ES細(xì)胞系,并誘導(dǎo)出了神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、心肌細(xì)胞和肝細(xì)胞。
目前,體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移(SCNT)是一項(xiàng)倍受矚目的技術(shù),將供體卵細(xì)胞去核后,植入患者體細(xì)胞核,假孕發(fā)育成囊胚,建立受者免疫耐受的ES細(xì)胞系,誘導(dǎo)分化成特定細(xì)胞后再進(jìn)行移植。
在對(duì)骨髓干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模臨床應(yīng)用之前,還需通過大量工作建立完善的技術(shù)體系,以獲得大量純化、穩(wěn)定和成熟的細(xì)胞。另外,還要闡明干細(xì)胞的遺傳和生物學(xué)表型特征,確定免疫逃逸和無腫瘤形成,評(píng)估其療效、副作用和危險(xiǎn)性。
在另一方面,通過對(duì)造血系腫瘤的研究發(fā)現(xiàn),腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖與干細(xì)胞之間有許多驚人的相似之處,因此提出了腫瘤的干細(xì)胞學(xué)說,為探索腫瘤的發(fā)生機(jī)制和腫瘤的預(yù)防治療提出了新的思路和方向。
