細(xì)胞:SK-MEL-1細(xì)胞
中文名稱:人皮膚黑色素瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
在干細(xì)胞成為血液細(xì)胞的過(guò)程中(該過(guò)程稱為造血作用),發(fā)現(xiàn)以前未被發(fā)現(xiàn)的步驟。了解血液疾病,識(shí)別血液細(xì)胞類型之間的基因表達(dá)的成千上萬(wàn)的差異。
這些差異導(dǎo)致了許多特定事件,這些事件在血液正常發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用。在這個(gè)過(guò)程中出錯(cuò)可能會(huì)導(dǎo)致血液疾病,包括白血病。
生成轉(zhuǎn)錄因子和其他蛋白質(zhì)調(diào)控這個(gè)復(fù)雜過(guò)程的綜合目錄。這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),RNA在造血過(guò)程中以不同的方式被剪切并粘貼到一起,導(dǎo)致每一個(gè)階段的蛋白特定形式。
直至本研究,血細(xì)胞生成在DNA的水平上有了比較充分的了解。不知道的是,然后DNA上的遺傳信息是如何轉(zhuǎn)錄生成RNA,導(dǎo)致蛋白的形成。、
已經(jīng)確定了上千個(gè)新的RNA被另一種方式處理的位點(diǎn),在血細(xì)胞發(fā)育的RNA的可變剪接的關(guān)鍵重要性是,通過(guò)研究?jī)煞N不同形式的同種轉(zhuǎn)錄因子在巨核細(xì)胞(血小板的的前體細(xì)胞)形成中的作用來(lái)說(shuō)明的。
這樣的事件改變了來(lái)源于單一基因的蛋白質(zhì)的數(shù)量,結(jié)構(gòu)和行為。替代蛋白可促進(jìn)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為不同的成熟血細(xì)胞。
這項(xiàng)研究所需的造血干細(xì)胞和其他細(xì)胞沒(méi)有被先前的人們研究的很詳細(xì),是因?yàn)樗鼈冊(cè)诔扇说墓撬柚袠O為罕見(jiàn)。埃伯教授說(shuō):“在這項(xiàng)研究中,我們能夠從捐贈(zèng)的臍帶血中純化出這些細(xì)胞,這些祖細(xì)胞在臍帶血中的濃度高得驚人。”
這項(xiàng)研究成果對(duì)患有血液疾病的病人有著重大應(yīng)用。可以開(kāi)始設(shè)計(jì)血液疾病(包括白血病)的診斷和新療法。它們將在未來(lái)的干細(xì)胞移植治療,再生醫(yī)學(xué)以及發(fā)現(xiàn)罕見(jiàn)的遺傳性血液病及免疫疾病的遺傳基礎(chǔ)中有著很大的價(jià)值。