細(xì)胞：C127細(xì)胞
中文名稱：小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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干細(xì)胞可以轉(zhuǎn)變?yōu)槿魏晤愋偷募?xì)胞，在癌癥治療中又是一個(gè)令人擔(dān)憂的問(wèn)題。人們認(rèn)為，惡性腫瘤中的干細(xì)胞能幫助癌癥抵抗治療。
在此之前，人們只在快速生長(zhǎng)的侵襲性腫瘤中鑒定到干細(xì)胞。在小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，緩慢生長(zhǎng)的腫瘤也擁有令人頭疼的干細(xì)胞。而這些低級(jí)別癌癥干細(xì)胞對(duì)抗癌藥物很不敏感，
將這些癌癥干細(xì)胞與健康干細(xì)胞進(jìn)行了比較,發(fā)現(xiàn)了它們抵抗藥物治療的機(jī)制，并由此提出了新的治療策略。“需要加大藥物劑量或者使用不同的藥物，以確保殺死這些癌癥干細(xì)胞，建立了NF1型低級(jí)別腦瘤的小鼠模型。在小鼠模型中鑒定了癌癥干細(xì)胞，并證明這些細(xì)胞移植到正常小鼠中能夠形成腫瘤。
據(jù)統(tǒng)計(jì)，每2500個(gè)嬰兒就有一個(gè)患有NF1。這種疾病會(huì)引起一系列問(wèn)題，包括腦部腫瘤、視力下降、學(xué)習(xí)困難、行為障礙、心臟缺陷和骨骼畸形。NF1患兒最常見(jiàn)的腦部腫瘤是視神經(jīng)膠質(zhì)瘤，治療這種腫瘤往往需要使用抑制細(xì)胞生長(zhǎng)通路的藥物。
這些藥物需要用十倍的劑量才能殺死低級(jí)別癌癥干細(xì)胞。研究表明，與大腦中的健康干細(xì)胞相比，癌癥干細(xì)胞生成了更多的Abcg1蛋白。
這些蛋白能幫助細(xì)胞在壓力條件下存活。Abcg1蛋白阻斷了一個(gè)細(xì)胞內(nèi)部信號(hào)，使癌癥干細(xì)胞對(duì)治療不敏感，如果能找到使這個(gè)蛋白失活的藥物，殺死癌癥干細(xì)胞就會(huì)更容易。這項(xiàng)研究使用的是NF1視神經(jīng)膠質(zhì)瘤的小鼠模型。
這一發(fā)現(xiàn)同樣適用于其他腦部腫瘤。干細(xì)胞還沒(méi)有分化成為特化細(xì)胞，它們很容易就能激活新基因啟動(dòng)新程序，幫助細(xì)胞在癌癥治療中生存下去；
