細胞：ZR-75-1細胞
中文名稱：人乳腺導管癌細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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揭示體細胞重編程染色質(zhì)動態(tài)變化規(guī)律
核小體作為染色質(zhì)的基本功能單位，主要由組蛋白八聚體及纏繞在組蛋白八聚體上的核心DNA序列組成。
組蛋白上能發(fā)生關鍵的表觀遺傳修飾，進而調(diào)控特定基因的表達。
以往研究描繪了全基因組范圍內(nèi)的核小體定位圖譜，但對體細胞重編程過程中核小體的動態(tài)變化及對基因表達調(diào)控的影響研究較少。
研究人員利用MEF、pre-iPSC和iPSC重編程三個階段的細胞作為模型，描繪了重編程過程中核小體定位及組蛋白修飾的動態(tài)變化及對基因表達的影響。
在體細胞重編程過程中，pre-iPS細胞的染色質(zhì)最為開放。在重編程過程中，核小體及不同組蛋白甲基化修飾在基因的啟動子區(qū)發(fā)生有規(guī)律的動態(tài)變化，這和基因表達水平密切相關。
最后，在pre-iPS細胞轉化為iPS細胞的過程中，維生素_C能夠顯著影響核小體及組蛋白甲基化修飾在重編程相關基因啟動子區(qū)的重定位。
