細(xì)胞：H1299細(xì)胞
中文名稱：人肺癌細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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揭示干細(xì)胞分化為胰島β-細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制
研究人員分析了胰腺干細(xì)胞向β-細(xì)胞分化過程中的微小核糖核酸變化規(guī)律，發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)胰腺干細(xì)胞向β-細(xì)胞分化中的關(guān)鍵通路，從轉(zhuǎn)錄水平上揭示了胰島素(insulin)分泌細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制。
干細(xì)胞是機(jī)體發(fā)育過程中保留在機(jī)體各組織器官、一類具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞，是組織工程和基因工程重要的種子細(xì)胞。
干細(xì)胞移植現(xiàn)已成為治療糖尿病的一種臨床新技術(shù)，利用具有較強(qiáng)增殖能力的胰腺干細(xì)胞離體大量增殖和分化為分泌胰島素的β-細(xì)胞是解決胰島移植過程中供體來源缺乏和免疫排斥問題的可行途徑之一。
此次通過構(gòu)建雞胰腺干細(xì)胞系，并研究調(diào)控胰腺干細(xì)胞分化的microRNA，通過對特異microRNA的靶基因預(yù)測，從54個靶基因中驗證3個靶基因作為microRNA-21調(diào)控對象參與胰腺干細(xì)胞向β-細(xì)胞定向分化并促進(jìn)胰島素分泌。
該研究成果不僅揭示了microRNA-21在胰腺發(fā)育中的作用，也為今后胰腺干細(xì)胞的研究提供理論依據(jù)。
