細(xì)胞:JAR細(xì)胞
中文名稱:人胎盤絨毛癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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抗Aβ療法或?qū)ι窠?jīng)損傷修復(fù)起反作用
小鼠的神經(jīng)損傷修復(fù)用減少大腦中β-淀粉樣(Aβ)沉積物的治療手段不僅沒有效果,還會(huì)起到反作用。作為阿爾茨海默氏癥的一種病理特征,Aβ沉積物會(huì)在大腦內(nèi)逐漸積累成塊。
突變的人體淀粉樣蛋白在動(dòng)物體內(nèi)的表達(dá)可導(dǎo)致斑塊的沉積,誘發(fā)神經(jīng)異?;顒?dòng)的增加并損害神經(jīng)回路的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。
通過治療那些過度表達(dá)人體突變淀粉樣前驅(qū)蛋白的小鼠,采用了兩種針對(duì)Aβ的不同抗體注射到14只小鼠體內(nèi),另外選了19只小鼠作為空白抗體對(duì)照。
雖然針對(duì)Aβ的抗體治療讓小鼠大腦內(nèi)的斑塊有所減少,但是也使得活躍神經(jīng)細(xì)胞的數(shù)量增多。
不論是年長(zhǎng)小鼠,還是那些未產(chǎn)生Aβ積累的年輕小鼠,治療的影響都是真實(shí)發(fā)生了。
但同樣的治療對(duì)正常小鼠的神經(jīng)活動(dòng)卻沒有效果,這意味著在突變小鼠身上觀察到的加重情況依賴于Aβ的存在,并不能解釋為是炎癥對(duì)抗體反應(yīng)所產(chǎn)生的附帶效果。
研究人員注意到,雖然其他研究有表明抗Aβ治療手段能夠防止患有阿爾茨海默癥的動(dòng)物體內(nèi)神經(jīng)連接的減弱以及記憶的損傷,但這些好處并不能幫助修復(fù)神經(jīng)功能障礙。
這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)從細(xì)胞層面的機(jī)制上部分解釋了為什么在人體臨床試驗(yàn)中針對(duì)Aβ的治療并不能改善認(rèn)知缺陷。
不過要弄清動(dòng)物體內(nèi)神經(jīng)異?;顒?dòng)的增加是否與Aβ療法的低效有關(guān),還需要進(jìn)一步研究才能確定。