細胞:UMR108細胞
中文名稱:大鼠骨肉瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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造成細胞融合的蛋白質(zhì),細胞融合在生物界很常見,但是機理并不清楚。這結果能幫助尋找用干細胞或含有修復基因的正常細胞對破損細胞進行融合修復的方法。
盡管之前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)幫助病毒找到宿主細胞并進行融合的蛋白質(zhì),但是以上結果首_次找到在一般動植物中驅(qū)動這一過程的蛋白質(zhì)。
首先在線蟲C.elegans細胞膜上發(fā)現(xiàn)了可能的融合蛋白EFF-1。為了驗證EFF-1在細胞中的作用,將這一蛋白放入實驗室培養(yǎng)的線蟲細胞中。很快他們發(fā)現(xiàn)EFF-1促進了細胞融合,形成有多個核的巨型細胞。
此外,所有融合細胞都必須含有EFF-1蛋白。EFF-1還能造成細胞的“半融合”--細胞膜結合到一起,而內(nèi)部的細胞質(zhì)不混合。這一半融合過程在病毒和細胞中都存在。
以上發(fā)現(xiàn)能幫助了解人類很多重要器官的形成過程。構成我們?nèi)种惑w重的長纖維狀骨骼肌就是細胞融合的結果。
理論上能利用這一過程進行細胞修復。但他們也表示含有多個核的細胞可能造成癌癥。并且也尚未在人類體內(nèi)找到類似EFF-1的蛋白質(zhì)。