細(xì)胞：EMT6細(xì)胞
中文名稱(chēng)： 小鼠乳腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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研究人員發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期生病兒童的母親，其細(xì)胞老化的程度比那些健康兒童的母親要大，這種細(xì)胞老化的反映指標(biāo)包括染色體端粒的長(zhǎng)度、DNA復(fù)合體和染色體末端的蛋白。端粒在每次細(xì)胞分裂時(shí)都會(huì)變短，因此它能夠作為細(xì)胞生物學(xué)年齡的一個(gè)標(biāo)記。
目前已經(jīng)有充足的證據(jù)證明長(zhǎng)期壓力導(dǎo)致健康狀況變差并且降低免疫力。為了進(jìn)一步研究這種，研究組將39位患慢性疾病兒童的母親和19位健康兒童的母親的壓力水平和端粒長(zhǎng)度進(jìn)行了比較。
研究人員要每個(gè)母親回答一份問(wèn)卷，以此評(píng)估她們?cè)谥耙粋€(gè)月的心理壓力水平，并且還對(duì)他們的血樣進(jìn)行檢測(cè)以確定端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性。為了評(píng)估氧化壓力，研究人員對(duì)她們的尿樣進(jìn)行檢測(cè)以此獲得與氧化有關(guān)的化合物水平的信息。
研究人員發(fā)現(xiàn)兩組的生物學(xué)測(cè)定結(jié)果沒(méi)有什么明顯差別。但是在需要照顧孩子的母親組中，孩子的年齡越大(她們的高壓力狀況持續(xù)的時(shí)間越長(zhǎng))，其母親的端粒酶活性越低，而且氧化壓力越大，還有端粒的長(zhǎng)度越短。
在壓力那一組中，這些母親的大約550個(gè)堿基對(duì)長(zhǎng)度的端粒丟失。根據(jù)研究人員估計(jì)，高壓力母親的血細(xì)胞的染色體年齡比那些低壓力母親老了9到17年。研究人員認(rèn)為氧化壓力最有可能是將壓力轉(zhuǎn)化成端?？s短的原因。
這項(xiàng)研究表明壓力促進(jìn)細(xì)胞的老化，并且暗示壓力對(duì)較年輕的成人的主要害處遠(yuǎn)比先前所想的要嚴(yán)重。
