細(xì)胞:HBEpiC細(xì)胞
中文名稱(chēng):人支氣管上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀(guān)察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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人類(lèi)的卵細(xì)胞可以孕育一個(gè)新的生命,也可以轉(zhuǎn)化為能夠拯救人類(lèi)生命的新細(xì)胞。但長(zhǎng)期以來(lái),人們對(duì)于卵細(xì)胞基因的認(rèn)識(shí)卻非常膚淺。
一研究成果使得人類(lèi)了解了卵細(xì)胞的獨(dú)_特基因,對(duì)于人類(lèi)認(rèn)知基因的相關(guān)功能具有極為重要的意義。通過(guò)與精仔結(jié)合,卵細(xì)胞將會(huì)持續(xù)不斷快速分裂,最終在人體內(nèi)形成胚胎并誕生一個(gè)全新的生命。
人體的卵細(xì)胞為什么具備這種神奇的能力?從根本上說(shuō),完_全是卵細(xì)胞的特殊基因使得卵子擁有了這種魔力。基因在卵細(xì)胞變化中起的作用,第一次徹_底破解了卵細(xì)胞的基因奧秘。
通過(guò)技術(shù)手段,我們可以讓未成熟的卵細(xì)胞產(chǎn)生其它種類(lèi)的特殊細(xì)胞,甚至包括干細(xì)胞,并培育出新的細(xì)胞組織。如果這一技術(shù)最終進(jìn)入臨床試驗(yàn),將可以治療人類(lèi)目前面臨的多種絕癥,如白血病等。”
研究小組正在通過(guò)無(wú)法受孕的卵細(xì)胞來(lái)培育干細(xì)胞,這一作法引起了相當(dāng)大的爭(zhēng)議性。研究人員們從她們未受孕的卵細(xì)胞中分解提取了一些RNA進(jìn)行研究試驗(yàn)。通過(guò)對(duì)這些卵細(xì)胞基因的對(duì)比分析,研究人員們最終確定了卵細(xì)胞基因的獨(dú)_特之處,并逐漸揭開(kāi)了人類(lèi)卵細(xì)胞基因的全部奧秘。
在提取干細(xì)胞胚胎時(shí)時(shí),研究人員們目前仍需要使用大量的人類(lèi)卵細(xì)胞。許多成熟卵細(xì)胞取自于進(jìn)行試管受精的婦女,但這些卵細(xì)胞往往只被允許用于試管受精。而進(jìn)行試管受精的婦女排出的卵細(xì)胞,通常有10%到15%是未成熟的,不能用于試管受精。
研究人員希望可以將這些通常被廢棄的卵細(xì)胞用于干細(xì)胞研究,豐富干細(xì)胞研究的卵細(xì)胞資源。研究人員首先將未成熟卵細(xì)胞置于含有女性苼殖激素的溶液中,讓其發(fā)育兩天左右,再將這些卵細(xì)胞的細(xì)胞核抽空,注入將要克隆體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)中,研究人員成功改造了25個(gè)未成熟卵細(xì)胞,其中5個(gè)卵細(xì)胞分別分化成兩個(gè)細(xì)胞,3個(gè)卵細(xì)胞分別分化成6到10個(gè)不等的細(xì)胞。但沒(méi)有卵細(xì)胞能夠分化發(fā)育到含有150個(gè)細(xì)胞的胚泡階段,而只有到了胚泡階段,研究人員們才能順利從這些細(xì)胞中提取出干細(xì)胞。