細(xì)胞：HIT-T15細(xì)胞
中文名稱：倉鼠beta胰島β細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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干細(xì)胞有兩大類。一是胚胎干細(xì)胞，二是成年干細(xì)胞。
胚胎干細(xì)胞一直被視為有分化成全身各組織器官的能力，如心、肝、肺和腸；骨骼、血液和肌肉；皮膚、眼睛和神經(jīng)系統(tǒng)等。而成年干細(xì)胞主要分布于骨髓、血液、大腦、胰腺等處，其作用有限。
1):固定性，如骨髓中的造血干細(xì)胞只是分化成各種血液細(xì)胞。
2):數(shù)量有限，較難分離和提純。
3):全能性低于胚胎干細(xì)胞，也就是說分化成各種類型的組織細(xì)胞的能力有限。
深入研究發(fā)現(xiàn)，盡管成年干細(xì)胞不如胚胎干細(xì)胞有全能性，但也具有像胚胎干細(xì)胞那樣潛在的全能分化能力，比如能分化出神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞等。
因此在胚胎干細(xì)胞受到倫理限制后，研究人員的目光轉(zhuǎn)到成年干細(xì)胞上，試圖誘導(dǎo)成年干細(xì)胞定向、定型生長，以治療相應(yīng)的疾病，比如修復(fù)心肌以治療心臟病。但是,大規(guī)模的臨床實(shí)踐證明，成年干細(xì)胞還是遜色不少，因而治病救人的重任還非胚胎干細(xì)胞莫屬。
