細(xì)胞:MA細(xì)胞
中文名稱:小鼠星型膠質(zhì)細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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神經(jīng)干細(xì)胞的分布:
神經(jīng)管形成以前 ,在整個(gè)神經(jīng)板檢測(cè)到神經(jīng)干細(xì)胞的選擇性標(biāo)記物神經(jīng)巢蛋白 (nestin),是細(xì)胞的骨架蛋白。
構(gòu)成小鼠神經(jīng)板的細(xì)胞 ,具有高效形成神經(jīng)球的能力。但目前尚不能肯定神經(jīng)板與神經(jīng)干細(xì)胞是否具有相同的誘導(dǎo)機(jī)制。(HFSF細(xì)胞 成纖維細(xì)胞 種屬:人)
神經(jīng)管形成后 ,神經(jīng)干細(xì)胞位于神經(jīng)管的腦室壁周邊。關(guān)于成腦神經(jīng)干細(xì)胞的分布 ,研究顯示成年嗅球、皮層、室管膜層或者室管膜下層、紋狀體、海馬的齒狀回顆粒細(xì)胞下層等腦組織中分布著神經(jīng)干細(xì)胞。
研究發(fā)現(xiàn)脊髓、隔區(qū)也分離出神經(jīng)干細(xì)胞 ,這些研究表明 ,神經(jīng)干細(xì)胞廣泛存在于神經(jīng)系統(tǒng)。在中央管周圍的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)后亦可形成神經(jīng)球并產(chǎn)生神經(jīng)元。(HFTF細(xì)胞 成纖維細(xì)胞 種屬:人)
脊髓損傷時(shí) ,來自于神經(jīng)干細(xì)胞的神經(jīng)元新生受到抑制 ,而神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多 ,其機(jī)制可能與生成神經(jīng)元的微環(huán)境有關(guān)。