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NCI-H524細(xì)胞復(fù)蘇(說(shuō)明書(shū)索取) 技術(shù)文章:
內(nèi)皮抑素(endostatin)是zui近發(fā)現(xiàn)的一種具有抑制血管生長(zhǎng)的蛋白質(zhì).
休眠蛋白(restin)是內(nèi)皮抑素的同源蛋白質(zhì), zui早由Ramchandran等人發(fā)現(xiàn), 它來(lái)源于膠原蛋白XV的羧端非膠原蛋白結(jié)構(gòu)域(NC1).
為了研究鼠源休眠蛋白對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的影響, 利用RT-PCR從鼠肌肉中擴(kuò)增出它的基因, 克隆入原核表達(dá)載體pQE32.
誘導(dǎo)后, 重組蛋白質(zhì)以包涵體形式表達(dá), 表達(dá)量約占菌體總蛋白質(zhì)的60%~70%.
重組蛋白質(zhì)經(jīng)純化復(fù)性后, 可以特異地抑制bFGF刺激的牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖, 但是休眠蛋白的抑制活性比內(nèi)皮抑素活性稍低.
流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn), 休眠蛋白可以引起內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞周期的改變, 并且引起細(xì)胞凋亡.
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