CCC-HBE-2細胞供應CCC-HBE-2細胞技術服務

為了您可以及時了解您所需要的細胞信息，建議直接細胞管理員，獲取培養(yǎng)說明書、價格、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)操作注意事項等問題；

細胞培養(yǎng)傳代操作：【嚴格遵照無菌操作】 

1、吸出原瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加胰酶（2-3ml0.25%）進行消化；

注意：胰酶消化時把握時間，通常控制在1-2min；

2、鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時去掉胰酶，加4-6ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散；

3、取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿、瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

細胞包裝：

復蘇細胞（T25培養(yǎng)瓶×1常溫運輸）

凍存細胞（凍存管、干冰包裝）

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部分細胞培養(yǎng)信息：（更多、更全的細胞信息 請資料細胞庫管理員）

BaF3細胞信息：    懸浮細胞    培養(yǎng)基：    90%  IMDM    血清：    10% 胎牛血清 

BALB/3T3 clone A31細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    90%  DMEM    血清：    10% 胎牛血清 

BCPAP細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    90%  F-12K    血清：    10% 胎牛血清 

BEAS-2B細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    90%  RPMI-1640    血清：    10% 胎牛血清 

BEL-7402細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    90%  RPMI-1640    血清：    10% 胎牛血清 

BEND.3細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    90%  DMEM高糖    血清：    10% 胎牛血清 

Beta-TC-6細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    80%  DMEM    血清：    20% 胎牛血清 

BeWo細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    90%  F12K    血清：    10% 胎牛血清 

BGC-823細胞信息：    貼壁細胞    培養(yǎng)基：    90%  RPMI-1640    血清：    10% 胎牛血清 

細胞進行蛋白質生產的質量控制對細胞的生存是非常重要的，在內質網(wǎng)中分子伴侶calnexin/calreticulin循環(huán)保證只有正確折疊的糖蛋白才能到達它們的目的地。

而錯誤折疊的糖蛋白則通過內質網(wǎng)的蛋白質降解途徑(ERAD-ER-associated degradation)進行降解。ERAD使蛋白質被逆向定位到細胞質中，再被蛋白酶解體進行降解。

以前發(fā)現(xiàn)一個跨膜的缺失甘露糖苷酶活性的alpha類甘露糖苷酶I型蛋白-EDEM(a transmembrane-mannosidase-I-like protein that lacks mannosidase activity)能夠加速ERAD的活性。

通派生物 現(xiàn)貨供應：    巨孢鏈霉菌    ATCC 43688

通派生物 現(xiàn)貨供應：    棘孢小單胞菌    ATCC 15837

N鏈接多糖Glc1Man9GlcNAc2的糖蛋白能夠與calnexin或calreticulin進行結合，由這兩個分子伴侶來促進它們的折疊，如果加入葡萄糖則能夠干擾這個過程。

但當折疊沒有*的時候，游離的糖蛋白或者由糖基轉移酶繼續(xù)糖基化然后由分子伴侶促進折疊，或者被內質網(wǎng)的alpha甘露糖苷酶I作用產生Man8GlcNAc2而將糖蛋白導向ERAD的降解途徑。

通派生物 現(xiàn)貨供應：    Amycolatopsis albidoflavus    ATCC53205

通派生物 現(xiàn)貨供應：    林肯鏈霉菌    ATCC 25466

Nagata and colleagues在*篇文章中發(fā)現(xiàn)EDEM與跨膜的分子伴侶calnexin作用，而不與可溶性的分子伴侶calreticulin，而且calnexin的跨膜區(qū)對它們的相互作用是必需的。

研究者用ERAD途徑降解的底物之一NHK(an α1-antitrypsin variant)分析發(fā)現(xiàn)，EDEM和NHK與calnexin的結合和底物從calnexin上的釋放對于EDEM介導的ERAD途徑是必需的。而且EDEM可以通過促進底物從calnexin的釋放來加速ERAD途徑。

通派生物 現(xiàn)貨供應：    米黑根毛霉    ATCC 26282

通派生物 現(xiàn)貨供應：    米根霉    ATCC 96382

發(fā)現(xiàn)過表達EDEM的水平不僅僅加速了膜結合的ERAD底物降解，也加速了可溶性的ERAD底物降解。而且當細胞內的EDEM水平降低時ERAD底物降解被減慢了。

他們的工作對于EDEM在內質網(wǎng)蛋白合成過程中的質量控制機制有了初步的探討。