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OE33人食管腺癌細胞 OE33細胞

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產(chǎn)品型號

品       牌通派生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2024-03-12 11:33:20瀏覽次數(shù):413次

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藥物MTT法實驗步驟:

貼壁細胞:

1: 收集對數(shù)期細胞,調(diào)整細胞懸液濃度,每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調(diào)密度 1000-10000 孔,(邊緣孔用無菌PBS填充)。

2: 5%CO2,37℃孵育,至細胞單層鋪滿孔底(96孔平底板),加入濃度梯度的藥物,原則上,細胞貼壁后即可加藥,或兩小時,或半天時間,但我們常在前天下午鋪板,次日上午加藥.一般5-7個梯度,每孔100ul,設(shè)3-5個復(fù)孔.建議設(shè)5個,否則難以反應(yīng)真實情況

3: 5%CO2,37℃孵育16-48小時,倒置顯微鏡下觀察。

4: 每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),繼續(xù)培養(yǎng)4h。若藥物與MTT能夠反應(yīng),可先離心后棄去培養(yǎng)液,小心用PBS沖2-3遍后,再加入含MTT的培養(yǎng)液。

5: 終止培養(yǎng),小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。

6: 每孔加入150ul二甲基亞砜,置搖床上低速振蕩10min,使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值。

7: 同時設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基、MTT、二甲基亞砜),對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜)。

Jurkat細胞株    急性T細胞白血病細胞

人皮膚成纖維細胞,HSAS1細胞

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人胚胎肌肉組織來源細胞,CCC-HSM-2細胞

人胚皮膚成纖維細胞,CCC-ESF-1細胞

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人整合SV40基因的乳上皮細胞,HBL-100細胞

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LLC細胞株    小鼠肺癌細胞

SK-BR-3細胞株    人乳癌細胞

AU565細胞株    人乳癌細胞

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