小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒服務(wù)標(biāo)準(zhǔn):
1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng),客戶在使用過程中測不出結(jié)果,等等?。?br />2.全程技術(shù)指導(dǎo)。(包括售前的標(biāo)本收集,使用過程中不明白的地方,實(shí)驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會即時給你去電)
3.提供免費(fèi)代測的服務(wù)。(你只需把標(biāo)本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù)。
需要而未提供的試劑和器材:
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱:小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse Desmin,Des Elisa Kit
產(chǎn)品規(guī)格:
48T(48T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。48T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測40個樣本,其他有7個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。 )
96T(96T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。96T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測90個樣,7個標(biāo)準(zhǔn)品控 1個空白對照。)
實(shí)驗設(shè)備及操作步驟
小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒檢測方法都可以通過標(biāo)準(zhǔn)酶標(biāo)儀使用。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:ELISA試劑盒內(nèi)附標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育
8. 洗滌
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
試劑盒本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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