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培養(yǎng)基真空干燥和操作方法

時(shí)間:2017/5/27閱讀:753
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    江蘇菲亞是大的一家科研試劑供應(yīng)商,主營(yíng)產(chǎn)品有:elisa試劑盒,生物試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,培養(yǎng)基血清,抗體,細(xì)胞等高產(chǎn)品。為了我們公司的發(fā)展,為了科研生物行業(yè)的發(fā)展,我們一直在努力!一直致力于不斷傾聽(tīng)、挖掘與滿(mǎn)足客戶(hù)的各種需求,孜孜不倦地追求產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)的突破與創(chuàng)新,立志成為上有影響力的、對(duì)生命科學(xué)研究和人類(lèi)的健康有巨大推動(dòng)作用的中國(guó)生物技術(shù)公司。  
  1,斜面保藏法將菌種轉(zhuǎn)接在適宜固體斜面培養(yǎng)基上,待其充分生長(zhǎng)后,用牛皮紙將棉塞部分包扎好(棉塞換成膠塞效果更好),置4C冰箱中包藏.保藏時(shí)間依微生物的種類(lèi)而定.霉菌,放線(xiàn)菌及芽孢菌保存2-4個(gè)月移種一次,酵母菌間隔兩個(gè)月,普通細(xì)菌一個(gè)月,假單胞菌兩周傳代一次.此法優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,使用方便,缺點(diǎn)是保藏時(shí)間短,易被污染.  
  2,液體石蠟保藏法將無(wú)菌石蠟加在已長(zhǎng)好菌的斜面上,其用量以高出斜面頂端1CM為準(zhǔn),使菌種與空氣隔絕.將試管直立,置低溫或室溫下保存.此法實(shí)用且效果較好.霉菌,放線(xiàn)菌,芽孢菌可保藏兩年以上,酵母菌可保藏1-2年,普通細(xì)菌也可保藏1年左右.  
  3,穿刺保藏法按穿刺接種方式培養(yǎng)菌種,菌種長(zhǎng)好后用膠塞封嚴(yán),置4
冰箱存放.  
  4,砂土管保藏法(1)河砂處理取河砂若干加入鹽酸10%,加熱煮沸30min除去有機(jī)機(jī)質(zhì).倒去鹽酸溶液,用自來(lái)水沖洗至中性,zui后一次用蒸鎦水沖洗,烘干后用40目篩子過(guò)篩,棄去粗顆粒,備用.(2)土壤處理取非耕作層不含腐殖質(zhì)的痩黃土或紅土,加自來(lái)水浸泡洗滌數(shù)次,直至中性.烘干后碾碎,用100目篩子過(guò)篩,粗顆粒部分丟掉.(3)砂土混合處理妥當(dāng)?shù)暮由芭c土壤按3:1的比例摻合(或根據(jù)需要而用其他比例,甚至可全部作砂或土)均勻后,裝入10x100mm的小試管或安瓿管中,每管分裝1g左右,塞上棉塞,進(jìn)行滅菌(通常采用間歇滅菌2--3次),zui后烘干.(4)無(wú)菌檢查每10支砂土管隨機(jī)抽1支,將砂土倒入肉湯培養(yǎng)基中,30
培養(yǎng)40h,若發(fā)現(xiàn)有微生物生長(zhǎng),所有砂土管則需重新滅菌,再作無(wú)菌試驗(yàn),直至證明無(wú)菌后方可使用.(5)菌懸液的制備取生長(zhǎng)健壯的新鮮斜面菌種,加入2-3ml無(wú)菌水(每18x180mm的試管斜面菌種),用接種環(huán)輕輕將菌苔洗下,制成菌懸液.(6)分裝樣品每支砂土管(注明標(biāo)記后)加入0.5ml菌懸液(剛剛使砂土潤(rùn)濕為宜),用接種針拌勻.(7)干燥將裝有菌懸液的砂土管放入干燥器內(nèi),干燥器底部盛有干燥劑.用真空泵抽干水分后火焰封口(也可用橡皮塞或棉塞塞住試管口).(8)保存置4冰箱或室溫干燥處,每隔一定的時(shí)間進(jìn)行檢測(cè).此法多用于產(chǎn)芽孢的細(xì)菌,產(chǎn)生孢子的霉菌和放線(xiàn)菌.在抗生素工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛,效果較好,可保存幾年時(shí)間,但對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞效果不佳.  
  5,冷凍真空干燥法(1)凍干管的準(zhǔn)備:中性硬制玻璃,烘干,滅菌.(2)菌種培養(yǎng):細(xì)菌芽孢脫落;放,霉孢子鳳滿(mǎn).(3)保護(hù)劑的配制:配制,滅菌,檢查(4)菌懸液的制備:2-3ml保護(hù)劑(5)分裝樣品:菌懸液每管0.2ml(6)預(yù)凍:程序控溫儀降溫(7)冷凍真空干燥:-50
下抽真空(8)取出樣品:輕敲松散即達(dá)標(biāo)(9)第二次干燥:(10)熔封(11)存

 

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