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當(dāng)前位置:江蘇菲亞生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>常用生化試劑的作用(下篇)
1.PVPP
PVPP對片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。
2.PIPES
哌*-N,N'-二(2-乙磺酸),實驗室做緩沖劑用。全名是哌*-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價格比較貴。常用在免疫和細胞類的實驗中,PIPES有時還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。
3.CTAB
十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實驗室zui常用的一種提取核酸的手段。
4、HEPES
羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES
5、MOPS
一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳
6、鹽酸胍
鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。
7、PMSF
Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié) 為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時后,可安全地予以丟棄。
8、溴酚藍
pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。
9、臺盼蘭
臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性
10、二甲苯青FF
用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍按照一定比例配置loading buffer
11、吖啶橙
是一種熒光色素,與細胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個相鄰的堿基對之間,這樣在DNA復(fù)制過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。
12、EDTA和EGTA
EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在.Mg2+存在下測定Ca2+時,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性..此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。
13.、TRICINE
N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果. 可以用前者代替。
14、PVP40
PVP40 中的CO - N = 有很強的結(jié)合酚類化合物的能力, 與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物, 常用于提取RNA時除去酚類。
15、脫氧膽酸鈉
離子型去垢劑,作用有:1、裂解細胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹(jǐn)慎
16、6-BA
細胞培養(yǎng)中用到,細胞分裂素。
17、碘代乙酰胺
也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺. 用于有機合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級試劑
18、萘乙酸
NAA,為廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑,可促進細胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等
19、番紅O
藏紅T;
氧化還原指示劑;生物染色;酸堿指示劑;滴定分析亞硝酸鹽。
20、TTC
2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細菌菌落長成紅顏色,對去除食品本底顆粒物干擾非常有意義.
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