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斑馬魚膽固醇(C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作方法

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本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                          48T

0.3nmol/L - 9nmol/L

 

使用目的:

本試劑盒用于測定斑馬魚血清、血漿及相關液體樣本中膽固醇(C)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中斑馬魚膽固醇(C)水平。用純化的斑馬魚膽固醇(C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入膽固醇(C,再與HRP標記的膽固醇(C)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膽固醇(C)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中斑馬魚膽固醇(C)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標試劑

6ml×1

8

標準品(16nmol/L

0.5ml×1

3

酶標包被板

12孔×8

9

標準品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

計算

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

 

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