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雞凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)酶聯(lián)免疫試劑盒操作方法

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本試劑盒僅供研究使用。

檢測(cè)范圍:                                                          96T

10pg/ml-260pg/ml

 

使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)水平。用純化的凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1),再與HRP標(biāo)記的凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品(480pg/ml

0.5ml×1

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說(shuō)明書(shū)

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1個(gè)

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

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