牛LEPelisa試劑盒間接法操作方法:

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃*夜。

2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW（超純水）洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

3、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

4、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

5、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O?D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

牛LEPelisa試劑盒待檢樣本有體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等。供貨期是3-5天，以及是盒裝液體產(chǎn)品性狀和低溫運(yùn)輸，用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸?shù)倪\(yùn)輸條件。

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