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人elisa試劑盒

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品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地鹽城市

更新時(shí)間:2018-03-05 09:29:27瀏覽次數(shù):898次

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實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集必修課:
1)標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2)血清:使用不含熱原的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
3)血漿:3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
4)細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
5)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
6)保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

 

質(zhì)量保證是一個(gè)復(fù)雜的過程,許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測(cè)的質(zhì)量:

一、方法學(xué)的影響
ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不*平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量**,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,并保證保存條件。

三、樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長(zhǎng)、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
四、操作因素對(duì)小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒結(jié)果的影響:加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。

五、灰區(qū)的設(shè)置

通常情況下,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽(yáng)性”和“陰性”來報(bào)告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽(yáng)性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測(cè)定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。

六、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測(cè)過程復(fù)雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法。

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