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安捷倫液相色譜儀HPLC的日常維護(hù)及保養(yǎng)　　1、手動進(jìn)樣器：　　平時應(yīng)該注意使用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗；如果出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染，一般要申請維修或更換配件?！　?、排液閥：　　此處不能密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損，可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。　　3、單向閥：　　如遇到泵壓不穩(wěn)或流動相不能抽取，則可能是單向閥出現(xiàn)問題，卸下用異丙醇超聲波清洗，清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中，切記不可與安裝方向倒置超洗！　　4、工作站：　　出現(xiàn)死機(jī)可重起計算機(jī)；不正常運(yùn)行時，首先可更換電腦測試其硬件故障；或在本機(jī)上重新插拔接口、重新安裝軟件?！　?、過濾器：安捷倫液相色譜儀　　當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時，有可能是此部件被污染， 拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片?！　?、吸濾頭：　　特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗；清洗不成功則需要更換?！　?、流動相的抽作要求：　　液相級色譜醇，二次蒸餾水，緩沖鹽一定要過濾；　　流動相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾，超聲波脫氣等方法)　　8、流通池：　　在色譜峰不正常時會可能是此部件補(bǔ)污染?？刹鹦逗笕〕銎渲械膲|片用異丙醇超洗(可根據(jù)說明書進(jìn)行操作或申請維修)?！　?、泵頭：　　泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請維修(如漏液，或更換柱塞桿及其密封墊等)　　泵壓不穩(wěn)：　　1、泵頭有氣泡——流動相脫氣/大流量沖洗泵/用注射器抽取流動動相　　2、單向閥故障——清洗　　若上述操作仍不能解決，可用異丙醇沖洗流動(無色譜柱沖洗，由手動進(jìn)樣器直接進(jìn)檢測器)，流量為3-4ml/min，沖洗50分鐘左右，然后重新安裝色譜柱，更換流動相平衡，如此再不能解決泵壓波動故障，可申請更換配件?！　?0.漏液處理：　　C18柱不能進(jìn)蛋白樣品、血樣，生物樣品?！　∫⒁庵拥腜H值范圍，不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品，特別是堿性樣品?！　￠L時間不用儀器，應(yīng)該將柱子取上用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應(yīng)該用有機(jī)相(如甲醇)保存，因為純水易長霉。　　流路堵塞問題：堵塞導(dǎo)致壓力太大，按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查，并清洗。清洗方法：①以民丙醇作溶劑沖洗②放在異丙醇中超聲波清洗③用10%稀硝酸清洗　　11.緩沖鹽的使用：　　流動相含有鹽分時，做完實驗后一定要進(jìn)行流路沖洗；　　首先用水沖洗，打開排液閥用PURG鍵轉(zhuǎn)換出原有含鹽的流動相，然后關(guān)閉排液閥打開泵沖洗全部流路45分鐘以上，如此更換流動相為水和甲醇混合液沖洗全部流路30分鐘(此步驟一般可省去，根據(jù)實驗而論)，zui后更換純甲醇沖洗全部流路45分鐘以上。　　12.泵頭沖洗；安捷倫液相色譜儀　　用備件中的針頭和針管分別用蒸餾水和純甲醇沖洗3-5ml?！　∪缌鲃酉嗖缓}，可對機(jī)器定期進(jìn)行簡單的沖洗維護(hù)，根據(jù)實驗多少而定?！　∈謩舆M(jìn)樣器沖洗；　　同樣用備件中的針管和專用沖洗針頭對手動進(jìn)樣器的裝載狀態(tài)和進(jìn)樣狀態(tài)分別進(jìn)行沖洗3-4ml的蒸餾水，然后再沖洗3-4ml的純甲醇。確保每次做完實驗，所有流路中充滿純甲醇！ 這樣操作能夠延長液相色譜柱使用壽命

　　液相色譜柱都是按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)和測試的，如能按照以下信息使用和維護(hù)色譜柱，不但能得到更佳的檢測結(jié)果，更能夠延長色譜柱的使用壽命。

　　色譜柱的安裝：

　　1、首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積，進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線，同時控制進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前，確認(rèn)流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護(hù)柱。

　　2、為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達(dá)的連接效果，應(yīng)盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭，如原來的接頭長期匹配其他類型的色譜柱，建議在連接新色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況，避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。

　　3、使用PEEK材料的通用接頭，只需用手?jǐn)Q緊不需要特定扳手，使用壓力為5000psi；使用溫度不得超過100℃。

　　流動相平衡：

　　1、在進(jìn)行樣品檢測前，至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應(yīng)當(dāng)天配制以保持新鮮避免細(xì)菌產(chǎn)生。

　　2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱，以免柱性能損壞（添加5％的有機(jī)溶劑沖洗色譜柱，同時可以達(dá)到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡）。

　　3、流動相需脫氣后使用，可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別，應(yīng)該使用過度分布的形式進(jìn)行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。

　　樣品制備與操作：

　　1、樣品應(yīng)當(dāng)盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外，如使用強(qiáng)溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。

　　2、樣品溶液在進(jìn)樣前應(yīng)使用針頭式過濾器對樣品預(yù)先過濾。頻繁改變流動相組成，會加速降低柱效。

　　3、色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力。為獲得分離效果，使用時請不要超過200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會造成硅膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外操作溫度不要超過60℃。

　　保存色譜柱：

　　1、如果流動相含有酸或無機(jī)鹽，應(yīng)當(dāng)先用去離子水（20倍柱體積）沖洗干凈。然后用用100％乙腈或甲醇保存色譜柱。最后用柱子的接頭密封，并放在穩(wěn)定的環(huán)境中存放。

　　2、應(yīng)避免色譜柱受到直接的機(jī)械沖擊或摔落，避免造成色譜柱性能的降低。

　　色譜柱的再生：

　　1、用相當(dāng)于20倍柱體積的溶劑按下列順序沖洗柱子，建議按柱子的箭頭方向沖洗，盡可能不反沖：沖洗時使用的的參考溶劑順序是水、甲醇、氯仿、異丙醇、甲醇。