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技術(shù)文章

保護柱的選擇,如何選擇液相色譜儀保護柱及使用方法

閱讀:33          發(fā)布時間:2025-1-17
  怎樣選擇保護柱,但又不影響分離分析?通常,在選擇保護柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔,對于大部分分析工作者來說,一只1cm長的保護柱便能提供充分的保護作用。但是,如果樣品非常不清潔,或工作中發(fā)現(xiàn)經(jīng)常要更換1cm的保護柱,那么就應該選用2cm或3cm的保護柱,保護柱越長自然所裝填的色譜填料就越多,則其保護性能越好,當然隨著保護柱長度的增加,樣品的保留時間也相應增加,一般來說,保護柱的內(nèi)徑與分析色譜柱的內(nèi)徑相同或相當即可。 保護柱的填料裝填方式也很重要,目前有薄膜裝填法的保護柱,使用過程簡單方便,而且可以在實驗室中進行干裝。但是,其zui大的缺點是不經(jīng)濟,特別是針對中國的具體情況,一次性使用相對費用較高。另外,薄膜裝填法的保護柱所裝填的色譜填料有限,只能提供很有限的保護作用;不過也因為所裝填的色譜填料較少,保護柱的長度也較短,所以對分析樣品的保留時間的影響也很小。 另一種保護柱結(jié)構(gòu)其實質(zhì)是縮短了色譜分析柱,設(shè)計方式上有直連式/手緊式或整體式。整體式設(shè)計是由色譜柱的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的,必須與色譜分析柱一同訂貨,可以非常方便的使用,但不能被修改。直連式結(jié)構(gòu)設(shè)計可以在任何時候由色譜工作者來安裝連接,可以與任何品牌的色譜柱連接使用,而且可以根據(jù)不同的樣品選擇合適的保護柱長度。手緊式保護柱從結(jié)構(gòu)上講是與直連式保護柱一樣,只是在連接時不用借助扳手等工具,直接用手上緊即可。另外從保護柱結(jié)構(gòu)的角度看,保護柱結(jié)構(gòu)又分為是否可以更換保護柱柱芯,現(xiàn)在大多數(shù)的保護柱均可以更換柱芯,可以降低保護柱的使用成本。 大多數(shù)人是根據(jù)色譜分析柱的填料來選擇保護柱的填料,正常情況下可以選擇與分析色譜柱一樣的色譜填料。但是,根據(jù)實際的分析工作,也可不必與分析色譜柱的填料匹配。 對于選擇保護柱的原則是:在滿足分離分析要求的前提條件下,盡可能的選擇較短的保護柱,盡可能選擇對分離樣品小一些保留性的填料。
 
  高效液相色譜儀緩沖鹽使用不當?shù)暮蠊?br /> 
  在高效液相色譜儀分析過程中,緩沖液是的,因為要用它來調(diào)節(jié)流動相的pH值,緩沖鹽使用不當,后果可是吃不了兜著走。比如說,液相色譜儀的色譜柱壓升高、柱效下降、保留時間異常等等不良影響:
 
  1、柱壓升高;
 
  原因:緩沖鹽使用不當導致緩沖鹽析出,堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙,阻礙流動相傳質(zhì),引起柱壓升高。
 
  2、相同化合物的保留時間發(fā)生變化;
 
  原因:如果沒有沖洗干凈就進行進樣,色譜柱內(nèi)含有的鹽會使化合物的保留時間發(fā)生變化。
 
  3、柱效下降;
 
  原因:
 
  i、有些緩沖鹽會滲入到鍵合相的深處,損害硅膠基體,導致色譜柱鍵合相流失,柱床變松,柱效下降;
 
  ii、凝結(jié)在鍵合相表面,使C18碳鏈難以舒展,對物質(zhì)的保留能力下降,導致柱效下降。因此液相色譜儀用過緩沖鹽后需要對色譜柱進行沖洗,水中緩沖鹽濃度較大時應特別引起注意。

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