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人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ ELISA試劑盒 ，南京金益柏： 問：elisa步驟？回答：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法：1. 包被：用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml,在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜.次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘.2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ ELISA試劑盒 ，南京金益柏： 問：elisa步驟？回答：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法：1. 包被：用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml,在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜.次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘.2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí).然后洗滌.（同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔）.3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,37℃孵育0.1小時(shí),洗滌.4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10～30分鐘.5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml.6. 結(jié)果判定：可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示.也可測OD值：在ELISA檢測儀上,于450nm（若以ABTS顯色,則410nm）處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性.
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