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江蘇菲亞生物科技有限公司
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細(xì)胞培養(yǎng)的制成
2019-6-11 閱讀(930)
因此培養(yǎng)在有膠原的底物上可能利于生長(zhǎng)，另外人或小鼠表皮在以3T3細(xì)胞為飼養(yǎng)層（用射線照射后）時(shí)，細(xì)胞易生長(zhǎng)并可發(fā)生一定程度的分化現(xiàn)象。降低PH、Ca2 含量和溫度，向培養(yǎng)基中加入表皮生長(zhǎng)因子，均有利于表皮細(xì)胞生長(zhǎng)。
以表皮細(xì)胞為例，用皮膚表皮和分離培養(yǎng)法可獲得純上皮細(xì)胞，方法如下：
1、取材：外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊，早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好，去角化層薄者，切成0.5-1平方厘米小塊。
2、置0.02%EDTA中，室溫，5分鐘。
3、換入0.25%胰蛋白酶中，4攝氏度過(guò)夜。
4、分離：取出皮塊，用血管鉗或鑷子將表皮與層分開(kāi)。
5、取出表皮，剪成更小的塊后，置0.25&胰酶中，37攝氏度，30-60分鐘。
6、反復(fù)吹打，制成懸液。
7、培養(yǎng)：用80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過(guò)后，低速離心，吸去上清。
8、直接加入培養(yǎng)基細(xì)胞懸液，接種入培養(yǎng)瓶，CO2溫箱培養(yǎng)。主要的客戶(hù)是醫(yī)學(xué)院校，做實(shí)行面向的種屬重要是人，大鼠和小鼠，如今市面市情上雞、牛、馬、羊、兔種種指標(biāo)的盒子都有售，真不知道這些抗體是怎么來(lái)的。據(jù)我所相識(shí)，這些炎癥指標(biāo)依然有很大種屬特異性的。
