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雞血清的制備與解凍方式
2019-9-20 閱讀(8684)
雞血清作為輔料加入制備副雞嗜血桿菌或禽多殺巴氏桿菌等細(xì)菌的培養(yǎng)基之一， 主要應(yīng)用于細(xì)菌培養(yǎng)，現(xiàn)市場購買雞血清，價格高，質(zhì)量參差不齊，往往影響生產(chǎn)的穩(wěn)定性和半成品的含菌量。
雞血清的制備大致可分為以下幾個步驟：
(1)雞血用離心機離心，收集濾過液，凍存；
(2)7-10天后取出化凍，用離心機離心后取上清液，冷凍保存；
(3)凍存3— 5天后，取出放在溫室中將血清化開，進(jìn)行兩次粗濾澄清；
(4)過濾除菌；
(5)室溫放置，然后置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時，即得。
雞血清解凍：將血清從冰凍區(qū)中取出后(切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀)，先置于2～8℃區(qū)域中使之融化，然后在室溫下使之全融。
使用前再預(yù)溫到將使用的溫度(如37℃)，但必須注意的是，解凍過程中應(yīng)輕輕地?fù)u晃均勻。血清在解凍過程中可能會出現(xiàn)少量絮狀或片狀析出物，主要是血清中脂蛋白的變性或是纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出，但這些析出物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
雞血清保存方法：
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學(xué)成分的分析，都以血清為樣品。
