背景介紹:Precursors of the cornified envelope of the stratum corneum.
晚期包膜蛋白2B抗體,Anti-LCE2B抗體簡(jiǎn)單介紹:
別 名:Late cornified envelope protein 2B; Late envelope protein 10; LCE2B; LCE2B_HUMAN; LEP10; Skin-specific protein Xp5; Small proline-rich-like epidermal differentiation complex protein 1B; SPRL1B; XP5.
此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售,相關(guān)標(biāo)記有:Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記
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中文名稱:晚期包膜蛋白2B抗體
英文名稱:Anti-LCE2B antibody
規(guī)格:0.1ml/0.2ml
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
抗原修復(fù)(免疫組化石蠟切片)
用于福爾馬林固定的石蠟包埋組織芯片需要抗原修復(fù)。
福爾馬林固定的組織有可能破壞了原來組織的抗原結(jié)構(gòu),蛋白多肽發(fā)生交聯(lián),導(dǎo)致部分抗原表位封閉,結(jié)合位點(diǎn)減少,所以需要抗原修復(fù),以暴露原來的抗原表位,達(dá)到充分顯露抗原,以不出現(xiàn)明顯脫片現(xiàn)象為佳。
抗原修復(fù)的幾種常用方法(供參考)
1、 微波爐加熱:
在微波爐里加熱0.01*緩沖液(pH6.0)至沸騰后將組織芯片放入,斷電,間隔5-10分鐘,反復(fù)1-2次。根據(jù)玻片情況可參考采用微波加熱“3-5-3法”3分鐘溫火沸騰后靜止5分鐘,再溫火沸騰3分鐘即可。
適用的抗原:來源于人、大鼠、小鼠的組織標(biāo)本;來源于其他動(dòng)物種屬的組織標(biāo)本。
2、 沸熱修復(fù):
電爐或水浴鍋加熱0.01M*緩沖液(pH6.0)至95℃左右,放入組織芯片加熱10-15分鐘。
3、 高壓熱修復(fù):
在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01m*緩沖溶液(pH6.0).蓋上不銹鋼鍋蓋,但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上,緩慢加壓,使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘,然后將蓋子鎖定,小閥門將會(huì)升起來。10分鐘后除去熱源,置入涼水中,當(dāng)小閥門沉下去后打開蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。(骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱修復(fù)) 。
4、 酶消化方法:
常用0.1%*和0.4%*液。*使用前預(yù)熱37℃,消化時(shí)間約為5-30分鐘。
適用于被固定遮蔽的抗原:包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等。
晚期包膜蛋白2B抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
免疫組化問題解答
1、染色過強(qiáng)?
原 因:抗體濃度過高或孵育時(shí)間過長(zhǎng)
解決方法:降低抗體滴度、抗體孵育時(shí)間:室溫1小時(shí)或4度過夜
原 因:孵育溫度過高超過37度
解決方法:一般在室溫20-28度
原 因:DAB顯色時(shí)間過長(zhǎng)或濃度過高
解決方法:顯色時(shí)間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)
2、非特異性背景染色?
原 因:操作過程中沖洗不充分
解決方法:每步?jīng)_洗3次每次5分鐘
原 因:組織中含過氧化物酶未阻斷
解決方法:可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時(shí)間延長(zhǎng)
原 因:組織中含內(nèi)原性*
解決方法:正常非免疫動(dòng)物血清再封閉
原 因:血清蛋白封閉不充分
解決方法:血清蛋白封閉不充分
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