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上海仁捷生物科技有限公司

大鼠*(LYS)ELISA測(cè)定試劑盒優(yōu)選品質(zhì)

時(shí)間:2018-2-26閱讀:266
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樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿等
標(biāo)記物:ELISA
適應(yīng)物種:大鼠
應(yīng)用:科研實(shí)驗(yàn)使用
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫
檢測(cè)限:0.1 U/L
供應(yīng)商:上海仁捷生物
數(shù)量:1000
規(guī)格:48T/96T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
預(yù)期應(yīng)用:本試劑盒是一個(gè)夾心酶免疫分析法體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)生物液體樣本中的濃度。

需自備的設(shè)備及試劑:
1.450±10nm濾光片酶標(biāo)儀(建議儀器使用前預(yù)熱)

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.

3.Eppendorf 移液器.

4.蒸餾水或去離子水.

5.脫脂棉吸水紙.

6.37℃恒溫箱.

7.100ml和1000ml量筒.

8.準(zhǔn)備若干個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管.

標(biāo)本的采集與保存:
1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將*碎。將剪碎的組織不對(duì)應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng) 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記彔。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玱璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測(cè)。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物標(biāo)本:
請(qǐng) 1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意:
1.以上標(biāo)本均需密封保存,4℃保存應(yīng)小于一周,-20℃ 不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月,-80℃保存可放置更久。

2.標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之溶解。

3.標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

標(biāo)本說(shuō)明:
1.本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
3.若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。
4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。
6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)楫a(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。
7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

實(shí)驗(yàn)原理:
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的*抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

精密度:
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<2727%

警告:
本試劑盒中使用了稀硫酸作為終止液,其具有輕微腐蝕性,使用時(shí)應(yīng)避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位。

優(yōu)勢(shì):
采用全進(jìn)口原料和抗體:、靈敏、特異,嚴(yán)格引進(jìn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行批量生產(chǎn)。
*的優(yōu)化方案:穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性。
提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)(為客戶提供來(lái)樣檢測(cè)服務(wù),zui大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性)
產(chǎn)品質(zhì)量保證,提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
友情提醒:試劑盒使用完畢后,請(qǐng)妥善處理相關(guān)耗材,避免環(huán)境污染!

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