產(chǎn)品名稱:人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA 試劑盒免費代測
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【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T統(tǒng)一兩種規(guī)格
【產(chǎn)品性狀】:盒裝液體。
【運輸方面】:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
【產(chǎn)品用途】:科研,不用于臨床
【保存條件】:2-8℃
【庫存】:現(xiàn)貨供應(yīng)
【檢測種屬】:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
【ELISA常用的方法】:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
ELISA試劑盒說明書
Elisa試驗在實驗室中比較常見,那么elisa實驗具體步驟怎么做,有沒有比較詳細的elisa試劑盒說明書呢?
Elisa試劑盒說明書如下:
ELISA試劑盒說明書1:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10靏/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA試劑盒說明書二:用于檢測未知抗體的間接法:
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10靏/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 2.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3.于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4.于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 5.于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6.可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
ELISA 是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標(biāo)本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點,已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細胞因子等領(lǐng)域
人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒間接法簡單操作步驟:
?。?/span>1)、將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原;
?。?/span>2)、加稀釋的受檢血清,保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗-體復(fù)合物;
?。?/span>3)、加酶標(biāo)抗抗體;
?。?/span>4)、加入酶促反應(yīng)底物,發(fā)生顯色反應(yīng),顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
ELISA試劑盒操作技術(shù)相關(guān)的注意事項:
- (FAS/CD95)ELISA試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA 試劑盒免費代測【其他產(chǎn)品】
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人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA 試劑盒免費代測所生產(chǎn)銷售的各種ELISA試劑盒均采用的是定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)??贵w具體為FGF6已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何FGF6目前被綁定的固定化抗體。*共軛的抗體特異性FGF6除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后,加入到孔中???蛋白共軛的辣根過氧化物酶(HRP)的洗滌后,加入到孔中。經(jīng)過洗滌,以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑,底物溶液加入到孔中,顯色成比例的量的初始步驟中的約束的FGF6。彩色顯影被停止并測量的顏色的強度。
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人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA 試劑盒免費代測如何鑒別不正規(guī)偽劣ELISA試劑盒
隨著生命科學(xué)技術(shù)的高速發(fā)展,生物公司如雨后春筍一般紛紛涌現(xiàn),各類生物試劑產(chǎn)品大大方便了科研工作者的工作。無疑,健康有序的生物試劑產(chǎn)業(yè)環(huán)境和秩序?qū)τ谡麄€行業(yè)的健康發(fā)展有著舉足輕重的作用。然而,近來許多客戶向我們反映一些唯利是圖的公司和小作坊,用不正規(guī)偽劣的ELISA試劑盒坑害廣大的科研工作者,他們往往唯利是圖,無視科學(xué)研究的嚴(yán)謹(jǐn)性和嚴(yán)肅性,讓廣大的科研工作者被動造假,嚴(yán)重擾亂了科研工作,嚴(yán)重擾亂了市場秩序,所以我們有義務(wù),有責(zé)任揭露這些作偽造假者制作不正規(guī)偽劣ELISA試劑盒的手法,同時提供如何鑒別這些不正規(guī)偽劣ELISA試劑盒的方法,供廣大的科研工作者和用戶參考,讓那些掛羊頭賣狗肉,冒牌進口試劑,以及全無誠信,作假造偽者,如過街之鼠,人人喊打。
造假一:在國外注冊公司,國內(nèi)生產(chǎn),隱瞞生產(chǎn)產(chǎn)地,明明是國產(chǎn)試劑卻宣稱國外進口虛報高價,欺騙廣大用戶。
鑒別方法:將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”關(guān)鍵詞在google上搜索,各類論壇的用戶會將該ELISA試劑盒的質(zhì)量和效果,是否偽劣一一有所討論。 造假二:仿冒進口ELISA試劑盒,使得進口分裝ELISA質(zhì)量參差不齊,魚龍混雜,很多都是經(jīng)小作坊粗劣加工而成,這樣的試劑盒偶爾可以僥幸做出結(jié)果,如果做不出來,所購買的公司又沒有完善的售后服務(wù),往往對客戶的問題推三阻四,推脫責(zé)任,zui后還是消費者吃虧。
鑒別方法:直接打給生產(chǎn)廠商,詢問他們試劑盒抗原和抗體的來源,索要試劑盒說明書,然后利用網(wǎng)絡(luò)確認這些信息,正規(guī)的ELISA生產(chǎn)商,這些信息都是非常齊全,如果信息不全,則該ELISA的制造水平和質(zhì)量都會很差。 造假三:某些不正規(guī)廠家為了夸大其生產(chǎn)ELISA涵蓋的指標(biāo)的范圍,用一種指標(biāo)來冒充其它指標(biāo),造成各種種屬、各種指標(biāo)都可以做的假象。比如用TGFβ這樣的指標(biāo)代替大多數(shù)試劑盒的其他指標(biāo)作為檢測抗體,同樣可以獲得良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。因為TGFβ在大多數(shù)哺乳類動物中(人、大鼠、小鼠、豬、牛„„)都有廣泛表達,種屬間抗原的氨基酸序列同源性達*,TGFβ隨著其他因子的影響,其表達水平也會發(fā)生相應(yīng)的變化,一般客戶很難察覺,因此這樣的惡性造假行為使得消費者被動造假,后果極其嚴(yán)重,因此善意提醒客戶警惕此類作假試劑
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA 試劑盒免費代測現(xiàn)貨供應(yīng),其它優(yōu)勢公司相關(guān)產(chǎn)品:
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委托單位的試驗材料和試劑等均須采用特快專遞形式郵寄,有低溫要求的、固定要求的,按低溫保存、固定防碎方法運輸,以確保實驗物品的安全可靠。