人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒

包裝規(guī)格：48T/96T

檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫

檢測(cè)標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液等

本試劑盒僅供科研使用!

人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒 廠家現(xiàn)貨供應(yīng)，*，質(zhì)量保證，提供96T和48T兩種規(guī)格ELISA試劑盒，僅供科研使用，不得用于臨床，使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。以下是大鼠5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒價(jià)格、報(bào)價(jià)、用途、規(guī)格、說(shuō)明書(shū)、相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作等詳細(xì)信息。

人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒全國(guó)包郵、發(fā)貨及時(shí)、質(zhì)量可靠、*、靈敏度高、效果穩(wěn)定、實(shí)驗(yàn)效果好，凡購(gòu)買公司ELISA試劑盒提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，提供一系列實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)及*的售前售中售后服務(wù)。公司嚴(yán)格要求產(chǎn)品質(zhì)量，如有質(zhì)量問(wèn)題(非人為因素)免費(fèi)包退換。

人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒使用注意事項(xiàng)：

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)

人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒之外語(yǔ)純生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品如下：

人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human dopamine D2 receptor,D2R ELISA KIISA. 96T/48T

人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Rat Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Mouse ovarian cancer marker-CA125 ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個(gè)月

改良Bielschowsky染色試劑盒5×50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,避光,3個(gè)月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.5)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個(gè)月

*溶液(0.5%,62.5KU)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個(gè)月

人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA KIT ELISA. 96T/48T

人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Serum amyloid A,SAA ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Rat interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)10ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個(gè)月

Weil髓鞘染色試劑盒4×100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：室溫,避光,12個(gè)月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.0)500ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個(gè)月

*溶液(0.1%,62.5KU)500ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個(gè)月

人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)human Neuregulin 1,NRG-1 ELISA KIISA. 96T/48T

人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Rat 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA KIISA. 96T/48T

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA KIISA. 96T/48T

*溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)5×1ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,12個(gè)月

Weil髓鞘染色試劑盒4×50ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：室溫,避光,12個(gè)月

Tris-HCL緩沖液(1mol/L,RNase free,pH8.0)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：4℃,高壓滅菌,6個(gè)月

*溶液(0.1%,12.5KU)100ml現(xiàn)貨供應(yīng)，保存：—20℃,避光,24個(gè)月

人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human Activin A,ACV-A ELISA KIISA. 96T/48T

人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA KIISA. 96T/48T

大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)Rat Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA KIT ELISA. 96T/48T

人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒　合成/代謝elisa試劑盒在實(shí)驗(yàn)前：

　　在使用前，將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測(cè)定前。據(jù)建議，所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來(lái)測(cè)定一式兩份。
　　
　　1。準(zhǔn)備好所有試劑，工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
　　
　　2。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥劑，密封保鮮袋，將未使用的井在4°C的含量布局表
　　
　　。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí)，在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。
　　
　　4。每孔中取出的液體，不洗。
　　
　　5。向每孔中加入100μl*抗體（1倍）。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí)，在37℃下（*抗體（1X）可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫，輕輕混勻，直到出現(xiàn)均勻解決方案。）
　　
　　6。吸液的各孔和洗滌，共洗滌三次重復(fù)該過(guò)程兩次。洗凈，每孔填充洗滌緩沖液（200μL）使用噴瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，靜置2分鐘，*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后，清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。
　　
　　7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí)，在37℃下
　　
　　8。重復(fù)的愿望/洗滌過(guò)??程中，在步驟6的5倍。
　　
　　9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘，在37℃下避光
　　
　　10。一站式解決方案，每孔加入底物，輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板，以確保充分混合。
　　
　　11。在5分鐘內(nèi)，設(shè)置至450nm，使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度。如果波長(zhǎng)校正，設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接，可能會(huì)比較高，不太準(zhǔn)確。

人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒  實(shí)驗(yàn)原理

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)原理

1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章，使得1966年開(kāi)始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

由于酶的催化頻率很高，故可*地地放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度

類型及步驟

ELISA的主要常用類型及步驟

1. 間接法測(cè)抗體

間接法是檢測(cè)抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(二抗)以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：

1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。

2)加稀釋的樣本，保溫反應(yīng)。樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，樣本中的其他成份在洗滌過(guò)程中被洗去。

3)加酶標(biāo)抗抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗抗體結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關(guān)。

4)加底物顯色。

2. 雙抗體夾心法測(cè)抗原

雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法，操作步驟如下：

1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

2)加受檢樣本，保溫反應(yīng)。樣本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

3)加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與樣本中受檢抗原的量相關(guān)。

4)加底物顯色。

3. 雙抗原夾心法測(cè)抗體

反應(yīng)原理和模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體

4.競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原

小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少，zui后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。

ELISA Q&A

  如何選擇合適的陽(yáng)性對(duì)照?

陽(yáng)性對(duì)照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測(cè)樣本的組成*，一般陽(yáng)性對(duì)照多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如，以人血清為標(biāo)本的測(cè)定，陽(yáng)性對(duì)照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。

如何選擇合適的陰性對(duì)照?

陰性對(duì)照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測(cè)樣本的組成*，先行檢測(cè)確定其中不含待檢物質(zhì)。比如，檢測(cè)人血清標(biāo)本時(shí)，陰性對(duì)照應(yīng)該選擇正常人血清;檢測(cè)免疫動(dòng)物血清中抗體效價(jià)時(shí)，陰性對(duì)照應(yīng)該選擇該動(dòng)物的免疫前血清。

如何選擇*化的包被條件?

1.包被抗原的選擇

包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被，對(duì)于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上，再通過(guò)特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上，一般都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián)，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。

2.包被液的選擇

一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。

3.包被溫度的選擇

通常是4-8度條件下過(guò)夜或者37度保溫2小時(shí)，我們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的保持。

4.包被濃度的選擇

包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml，要明確針對(duì)特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。

包板后需要封閉嗎?應(yīng)該選擇什么樣的封閉體系?

封閉是否必要，取決于ELISA的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件。一般說(shuō)來(lái)，雙抗體夾心法，只要酶標(biāo)記物是高活性的，操作時(shí)洗滌*，不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。而在間接法測(cè)定中，封閉一般是*的。

常用的封閉劑有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明膠、5%的脫脂奶粉，AbMART*使用5%脫脂奶粉，價(jià)廉而且封閉能力強(qiáng)，不過(guò)5%脫脂奶粉只適合短期內(nèi)使用，不宜*保存，所以試劑盒中較少使用。

 如何正確使用酶結(jié)合物?

1.酶結(jié)合物的稀釋液

在稀釋液中常加入高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)(例如1%BSA或5%脫脂奶粉)，通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附。一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20(0.05%的濃度較為適宜)。

2.正確稀釋酶結(jié)合物

酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定，濃度過(guò)高易導(dǎo)致本底偏高，濃度過(guò)低則會(huì)導(dǎo)致陽(yáng)性信號(hào)的減弱。

酶結(jié)合物在使用前稀釋，稀釋后的酶結(jié)合物不宜*保存，因?yàn)榈蜐舛鹊拿附Y(jié)合物極易失活。