在了解葉綠素含量測定方法前,我們先來了解下葉綠素對植物生長的意義:葉綠素存在于綠色植物的葉細(xì)胞里,葉細(xì)胞中含有一種葉綠體,在葉綠體中則存在一種*而重要的綠色色素,那就是葉綠素,葉綠素的功能是進(jìn)行光合作用,把吸收的二氧化碳和水合成有機(jī)物,作為植物生長所需的能量貯存起來,對植物的生長有著重要的作用,因此,需要測定葉綠素含量,并通過測定的數(shù)據(jù)分析植物的生長狀況。
一、研磨法:
該方法需要把植物材料研磨并經(jīng)轉(zhuǎn)移、過濾或離心處理,不僅步驟繁瑣,工作量大,且在提取過程中國易損失樣品,葉綠素受光氧化而引起測量誤差,而且不可避免地使試驗(yàn)人員較長時(shí)間與揮發(fā)于空氣中的實(shí)際相接觸,對人體損害較大。
二、光電比色法:
葉綠素含量測定的經(jīng)典方法是光電比色法,即用光電比色計(jì)以無機(jī)有色溶液為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比色測定,該方法不僅需要配制無機(jī)標(biāo)準(zhǔn)溶液,而且不能對溶液中不同色素分子進(jìn)行定量測定。
三、分光光度法:
分光光度法測定葉綠素含量,就是利用葉綠素a和葉綠素b吸收光譜的不同,測定各特定峰值波長下的光密度,在根據(jù)色素分子在該波長下的消光系數(shù),計(jì)算出濃度。
分光光度法的注意事項(xiàng):
1、為了避免葉綠素光解,操作時(shí)應(yīng)在弱光下進(jìn)行,淹沒時(shí)間應(yīng)盡量短些。
2、葉綠素提取液不能渾濁。
四、原子吸收光譜法:通過測定鎂元素的含量,進(jìn)而間接計(jì)算葉綠素的含量。
五、光聲光譜法:
光聲光譜發(fā)作為一門新興技術(shù)已被廣泛地應(yīng)用于各門學(xué)科的研究之中。光聲光譜可以得到任何類型固態(tài)物質(zhì)的光譜對于許多傳統(tǒng)光譜哪一測定的不透明、高反射、高散射試樣,常無需制樣或稍加制樣即可簡便地加以測定。
六、葉綠素含量測定儀:
SPAD502PLUS葉綠素含量測定儀的工作原理是通過測量葉片在兩種波長范圍內(nèi)的透光系數(shù)來確定葉片當(dāng)前葉綠素的相對含量。優(yōu)點(diǎn)是機(jī)身小巧,可隨身攜帶,可進(jìn)行活體測量。