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ELISA檢測試劑盒的根底是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍堅持其免疫學(xué)活性,酶符號的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測守時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的辦法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分隔。再加入酶符號的抗原或抗體,也經(jīng)過反響而結(jié)合在固相載體上。此刻固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的份額。加入酶反響的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)品,產(chǎn)品的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可依據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。因為酶的催化功率很高,間接地擴大了免疫反響的結(jié)果,使測定辦法達到很高的敏感度。
ELISA檢測方法的三大特點表現(xiàn):
1.穩(wěn)定性好:包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到保證,早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只有3-4個月,采用基因工程抗原后效期大大延長了。
2.檢出率高:基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達,表達產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇,可提高試劑盒的靈敏度,提高檢出率。
3.分子量大:合成肽采用化學(xué)方法制備,由于工藝的局限,合成數(shù)量有限,只能達到數(shù)百個氨基酸。而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。
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