產品名稱:輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒100T圖片
規(guī)格:100T
測試方法:高效液相色譜法
測定意義:
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,NAD是糖酵解和TCA循環(huán)的主要氫受體,生成的NADH經呼吸電子鏈傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環(huán)的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態(tài),NADH/NAD比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外,NAD降解產物具有非常重要的調控作用。
測定原理:
NAD和NADH在254 nm下有吸收峰,利用高效液相色譜法在相應波長下測定其含量。
需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、低速離心機、溶劑抽濾裝置、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系和有機系各2個,0.45μm)、C18柱(4.6 ×150 mm)、可調式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、乙腈(120 mL)、甲醇(色譜級,300 mL)、蒸餾水
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒100T圖片試劑使用須知:
(1)請參照相關法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術人員。必須在專業(yè)人士的指導監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關法律法規(guī)正當處理。
(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒100T圖片樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細菌或細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
我公司提供的輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒100T圖片方法分類:紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務!咨詢!
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